热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
10期
1950-1956
,共7页
曹天骏%戴好富%李辉亮%郭冬%梅文莉%彭世清
曹天駿%戴好富%李輝亮%郭鼕%梅文莉%彭世清
조천준%대호부%리휘량%곽동%매문리%팽세청
白木香%查尔酮合酶%启动子%染色体步移%瞬时表达%GUS
白木香%查爾酮閤酶%啟動子%染色體步移%瞬時錶達%GUS
백목향%사이동합매%계동자%염색체보이%순시표체%GUS
Aquilaria sinensis%Chalcone synthases%Promoter%Genome Walker%Transient expression%β-Glucuronidase
利用染色体步移法克隆了白木香查尔酮合成酶基因(AsCHS1)ATG上游1 082 bp的启动子序列,该启动子序列中AT含量高达69.03％,符合真核生物启动子的序列特征.通过启动子预测软件分析可知,该序列的转录起始位点位于翻译起始位点-65 bp处,并且其上游-25～30 bp区域存在TATA-box等典型的真核生物启动子核心元件,同时含有一些顺式作用元件如赤霉素应答元件GARE-motif、茉莉酸甲酯应答元件CGTCA-motif、水杨酸应答元件TCA-element等激素调控元件,光应答元件Box Ⅰ、G-Box、ACE,厌氧诱导元件ARE等.通过构建pC-1 082proAsCHS1植物表达载体,借助农杆菌将重组载体转化到烟草叶片中.蛋白定量结果表明,该序列可以驱动GUS的表达,具有启动子活性;脱落酸显著增强该启动子的活性,乙烯则显著抑制该启动子的活性.
利用染色體步移法剋隆瞭白木香查爾酮閤成酶基因(AsCHS1)ATG上遊1 082 bp的啟動子序列,該啟動子序列中AT含量高達69.03％,符閤真覈生物啟動子的序列特徵.通過啟動子預測軟件分析可知,該序列的轉錄起始位點位于翻譯起始位點-65 bp處,併且其上遊-25～30 bp區域存在TATA-box等典型的真覈生物啟動子覈心元件,同時含有一些順式作用元件如赤黴素應答元件GARE-motif、茉莉痠甲酯應答元件CGTCA-motif、水楊痠應答元件TCA-element等激素調控元件,光應答元件Box Ⅰ、G-Box、ACE,厭氧誘導元件ARE等.通過構建pC-1 082proAsCHS1植物錶達載體,藉助農桿菌將重組載體轉化到煙草葉片中.蛋白定量結果錶明,該序列可以驅動GUS的錶達,具有啟動子活性;脫落痠顯著增彊該啟動子的活性,乙烯則顯著抑製該啟動子的活性.
이용염색체보이법극륭료백목향사이동합성매기인(AsCHS1)ATG상유1 082 bp적계동자서렬,해계동자서렬중AT함량고체69.03％,부합진핵생물계동자적서렬특정.통과계동자예측연건분석가지,해서렬적전록기시위점위우번역기시위점-65 bp처,병차기상유-25～30 bp구역존재TATA-box등전형적진핵생물계동자핵심원건,동시함유일사순식작용원건여적매소응답원건GARE-motif、말리산갑지응답원건CGTCA-motif、수양산응답원건TCA-element등격소조공원건,광응답원건Box Ⅰ、G-Box、ACE,염양유도원건ARE등.통과구건pC-1 082proAsCHS1식물표체재체,차조농간균장중조재체전화도연초협편중.단백정량결과표명,해서렬가이구동GUS적표체,구유계동자활성;탈락산현저증강해계동자적활성,을희칙현저억제해계동자적활성.
