微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2014年
5期
38-43
,共6页
何晓娇%陈璨%周月婷%马泽萍%潘红影%胡乔月%蒋冬花
何曉嬌%陳璨%週月婷%馬澤萍%潘紅影%鬍喬月%蔣鼕花
하효교%진찬%주월정%마택평%반홍영%호교월%장동화
红曲霉%GABA%桔霉素%发酵%T-DNA
紅麯黴%GABA%桔黴素%髮酵%T-DNA
홍곡매%GABA%길매소%발효%T-DNA
Monascus rubber%GABA%citrinin%fermentation%T-DNA
以红曲米中筛选到的红色红曲霉菌株G为原始菌株,通过农杆菌介导T-DNA插入突变技术,成功构建了含有1 483株红曲霉突变子的T-DNA插入突变库.用HPLC等方法从突变库中筛选出10株γ-氨基丁酸(GABA)产量稳定高于原始菌株G的突变子,薄层层析结合HPLC技术分析了10株突变子发酵液中桔霉素的含量;其中突变子1047的GABA产量较高,为1.169 g/L,是原始菌株G(GABA产量0.472 g/L)的247.67%,桔霉素含量稳定低于原始菌株G.以红曲霉菌株G和突变子1047为实验材料,通过5L发酵罐发酵并定时取样,HPLC等方法精确分析发酵液各种活性物质的含量;结果显示,突变子1047生长速度稍快于原始菌株G;GABA、莫纳可林K(Monacolin K)、红曲色素色价分别为2.201 g/L、83.892 mg/L、21.984 U/mL,是原始菌株G的279.67%、108.01%和182.35%;而桔霉素产量为1.976 mg/L,是原始菌株G的41.71%.因此,利用T-DNA插入的方法对红曲霉进行育种,能产生稳定的遗传变化,在红曲霉资源的保护和利用上有一定潜力.
以紅麯米中篩選到的紅色紅麯黴菌株G為原始菌株,通過農桿菌介導T-DNA插入突變技術,成功構建瞭含有1 483株紅麯黴突變子的T-DNA插入突變庫.用HPLC等方法從突變庫中篩選齣10株γ-氨基丁痠(GABA)產量穩定高于原始菌株G的突變子,薄層層析結閤HPLC技術分析瞭10株突變子髮酵液中桔黴素的含量;其中突變子1047的GABA產量較高,為1.169 g/L,是原始菌株G(GABA產量0.472 g/L)的247.67%,桔黴素含量穩定低于原始菌株G.以紅麯黴菌株G和突變子1047為實驗材料,通過5L髮酵罐髮酵併定時取樣,HPLC等方法精確分析髮酵液各種活性物質的含量;結果顯示,突變子1047生長速度稍快于原始菌株G;GABA、莫納可林K(Monacolin K)、紅麯色素色價分彆為2.201 g/L、83.892 mg/L、21.984 U/mL,是原始菌株G的279.67%、108.01%和182.35%;而桔黴素產量為1.976 mg/L,是原始菌株G的41.71%.因此,利用T-DNA插入的方法對紅麯黴進行育種,能產生穩定的遺傳變化,在紅麯黴資源的保護和利用上有一定潛力.
이홍곡미중사선도적홍색홍곡매균주G위원시균주,통과농간균개도T-DNA삽입돌변기술,성공구건료함유1 483주홍곡매돌변자적T-DNA삽입돌변고.용HPLC등방법종돌변고중사선출10주γ-안기정산(GABA)산량은정고우원시균주G적돌변자,박층층석결합HPLC기술분석료10주돌변자발효액중길매소적함량;기중돌변자1047적GABA산량교고,위1.169 g/L,시원시균주G(GABA산량0.472 g/L)적247.67%,길매소함량은정저우원시균주G.이홍곡매균주G화돌변자1047위실험재료,통과5L발효관발효병정시취양,HPLC등방법정학분석발효액각충활성물질적함량;결과현시,돌변자1047생장속도초쾌우원시균주G;GABA、막납가림K(Monacolin K)、홍곡색소색개분별위2.201 g/L、83.892 mg/L、21.984 U/mL,시원시균주G적279.67%、108.01%화182.35%;이길매소산량위1.976 mg/L,시원시균주G적41.71%.인차,이용T-DNA삽입적방법대홍곡매진행육충,능산생은정적유전변화,재홍곡매자원적보호화이용상유일정잠력.