安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2014年
11期
1539-1543
,共5页
朱童娜%吴璇%邱欢%于莉%黄升海
硃童娜%吳璇%邱歡%于莉%黃升海
주동나%오선%구환%우리%황승해
呼吸道合胞病毒%Toll样受体7%氧化应激%A549细胞
呼吸道閤胞病毒%Toll樣受體7%氧化應激%A549細胞
호흡도합포병독%Toll양수체7%양화응격%A549세포
respiratory syncytial virus%Toll-like receptor 7%oxidative stress%A549 cells
目的 观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染人肺上皮细胞(A549细胞)引起的氧化应激对Toll样受体7(TLR7)活化及其主要信号分子的作用,探讨其所介导的抗炎作用和可能的调控机制,为临床治疗和预防RSV感染提供新的思路.方法 RSV体外感染A549细胞为感染组,以抗氧化剂BHA进行预处理作为抗氧化剂组,于感染后的4、8、12、24h收集细胞,以未感染细胞作为正常组.①化学法检测活性氧指标·OH含量的变化;②硝酸还原酶法检测NO含量的变化;③用TRIzol提取细胞总RNA,通过半定量RT-PCR法检测TLR7、白介素(IL-6)的mRNA转录水平的变化;④ELISA法检测细胞上清液中IL-6的表达变化;⑤MTT法检测各组细胞增殖情况.结果 ①感染组里·OH的含量升高并呈时间依赖性,在抗氧化剂组,·OH的含量与感染组相比是降低的;②感染组各时间段NO含量升高并呈时间依赖性,抗氧化剂组的NO含量与感染组同一时间点相比降低;③感染组中不同时间点的TLR7基因转录水平表达上调,抗氧化剂组TLR7的表达虽有上调,表达量都比感染组同时间点下降;④感染组里IL-6的表达量与感染之间有时间依赖性关系,抗氧化剂组IL-6的表达虽有上调,但比感染组同时间点下降;⑤感染组随时间点的延长,细胞抑制率增加,抗氧化剂组的细胞抑制率与感染组相比下调明显.结论 RSV感染可诱导氧化应激的产生,在加入抗氧化剂BHA预处理后,可明显减轻TLR7及其下游主要信号分子的表达变化和细胞抑制率,表明RSV感染活化TLR7及引起细胞损伤可能是通过氧化应激途径来调节的.
目的 觀察呼吸道閤胞病毒(RSV)感染人肺上皮細胞(A549細胞)引起的氧化應激對Toll樣受體7(TLR7)活化及其主要信號分子的作用,探討其所介導的抗炎作用和可能的調控機製,為臨床治療和預防RSV感染提供新的思路.方法 RSV體外感染A549細胞為感染組,以抗氧化劑BHA進行預處理作為抗氧化劑組,于感染後的4、8、12、24h收集細胞,以未感染細胞作為正常組.①化學法檢測活性氧指標·OH含量的變化;②硝痠還原酶法檢測NO含量的變化;③用TRIzol提取細胞總RNA,通過半定量RT-PCR法檢測TLR7、白介素(IL-6)的mRNA轉錄水平的變化;④ELISA法檢測細胞上清液中IL-6的錶達變化;⑤MTT法檢測各組細胞增殖情況.結果 ①感染組裏·OH的含量升高併呈時間依賴性,在抗氧化劑組,·OH的含量與感染組相比是降低的;②感染組各時間段NO含量升高併呈時間依賴性,抗氧化劑組的NO含量與感染組同一時間點相比降低;③感染組中不同時間點的TLR7基因轉錄水平錶達上調,抗氧化劑組TLR7的錶達雖有上調,錶達量都比感染組同時間點下降;④感染組裏IL-6的錶達量與感染之間有時間依賴性關繫,抗氧化劑組IL-6的錶達雖有上調,但比感染組同時間點下降;⑤感染組隨時間點的延長,細胞抑製率增加,抗氧化劑組的細胞抑製率與感染組相比下調明顯.結論 RSV感染可誘導氧化應激的產生,在加入抗氧化劑BHA預處理後,可明顯減輕TLR7及其下遊主要信號分子的錶達變化和細胞抑製率,錶明RSV感染活化TLR7及引起細胞損傷可能是通過氧化應激途徑來調節的.
목적 관찰호흡도합포병독(RSV)감염인폐상피세포(A549세포)인기적양화응격대Toll양수체7(TLR7)활화급기주요신호분자적작용,탐토기소개도적항염작용화가능적조공궤제,위림상치료화예방RSV감염제공신적사로.방법 RSV체외감염A549세포위감염조,이항양화제BHA진행예처리작위항양화제조,우감염후적4、8、12、24h수집세포,이미감염세포작위정상조.①화학법검측활성양지표·OH함량적변화;②초산환원매법검측NO함량적변화;③용TRIzol제취세포총RNA,통과반정량RT-PCR법검측TLR7、백개소(IL-6)적mRNA전록수평적변화;④ELISA법검측세포상청액중IL-6적표체변화;⑤MTT법검측각조세포증식정황.결과 ①감염조리·OH적함량승고병정시간의뢰성,재항양화제조,·OH적함량여감염조상비시강저적;②감염조각시간단NO함량승고병정시간의뢰성,항양화제조적NO함량여감염조동일시간점상비강저;③감염조중불동시간점적TLR7기인전록수평표체상조,항양화제조TLR7적표체수유상조,표체량도비감염조동시간점하강;④감염조리IL-6적표체량여감염지간유시간의뢰성관계,항양화제조IL-6적표체수유상조,단비감염조동시간점하강;⑤감염조수시간점적연장,세포억제솔증가,항양화제조적세포억제솔여감염조상비하조명현.결론 RSV감염가유도양화응격적산생,재가입항양화제BHA예처리후,가명현감경TLR7급기하유주요신호분자적표체변화화세포억제솔,표명RSV감염활화TLR7급인기세포손상가능시통과양화응격도경래조절적.
