化学通报(印刷版)
化學通報(印刷版)
화학통보(인쇄판)
CHEMISTRY
2014年
12期
1196-1201
,共6页
金瑾%朱嘉%杨少媛%雷振%郑积敏%贾宗超
金瑾%硃嘉%楊少媛%雷振%鄭積敏%賈宗超
금근%주가%양소원%뢰진%정적민%가종초
抗生素%革兰氏阴性菌%脂多糖%外膜%WaaP
抗生素%革蘭氏陰性菌%脂多糖%外膜%WaaP
항생소%혁란씨음성균%지다당%외막%WaaP
Antibiotic%Gram-negative bacteria%Lipopolysaccharide%Outer membrane%WaaP
采用基因重组方法构建来源于大肠杆菌和铜绿假单胞菌的waaP基因的克隆,利用多种感受态细胞表达出带有不同纯化标签的可溶性WaaP蛋白,并利用亲合层析和凝胶过滤层析对可溶性WaaP蛋白进行纯化,用SDS-PAGE进行检测.对比大肠杆菌和铜绿假单胞菌中WaaP的表达和纯化结果,为蛋白结晶选取能够得到大量稳定和高纯度WaaP蛋白的表达纯化方法,并用该方法,使用硒代甲硫氨酸培养基表达出硒代甲硫氨酸标记的WaaP,为蛋白结构解析时相位的确定提供依据.
採用基因重組方法構建來源于大腸桿菌和銅綠假單胞菌的waaP基因的剋隆,利用多種感受態細胞錶達齣帶有不同純化標籤的可溶性WaaP蛋白,併利用親閤層析和凝膠過濾層析對可溶性WaaP蛋白進行純化,用SDS-PAGE進行檢測.對比大腸桿菌和銅綠假單胞菌中WaaP的錶達和純化結果,為蛋白結晶選取能夠得到大量穩定和高純度WaaP蛋白的錶達純化方法,併用該方法,使用硒代甲硫氨痠培養基錶達齣硒代甲硫氨痠標記的WaaP,為蛋白結構解析時相位的確定提供依據.
채용기인중조방법구건래원우대장간균화동록가단포균적waaP기인적극륭,이용다충감수태세포표체출대유불동순화표첨적가용성WaaP단백,병이용친합층석화응효과려층석대가용성WaaP단백진행순화,용SDS-PAGE진행검측.대비대장간균화동록가단포균중WaaP적표체화순화결과,위단백결정선취능구득도대량은정화고순도WaaP단백적표체순화방법,병용해방법,사용서대갑류안산배양기표체출서대갑류안산표기적WaaP,위단백결구해석시상위적학정제공의거.