生态毒理学报
生態毒理學報
생태독이학보
ASIAN JOURNAL OF ECOTOXICOLOGY
2014年
6期
1035-1040
,共6页
程炜轩%许国焕%熊达%张丽%吴清洋%郭莹姿%谭文俊
程煒軒%許國煥%熊達%張麗%吳清洋%郭瑩姿%譚文俊
정위헌%허국환%웅체%장려%오청양%곽형자%담문준
黑素皮质素受体%原代培养%克隆%黄颡鱼
黑素皮質素受體%原代培養%剋隆%黃顙魚
흑소피질소수체%원대배양%극륭%황상어
melanocortin receptor%primary culture%cloning%Pelteobagrus fulvidraco
黑素皮质素受体-1(MC1R)在鱼体中对黑色素细胞的分化及迁移起主要的调控作用,而且在神经系统和免疫系统中均表现出重要的生理功能.本研究对黄颡鱼表皮黑色素细胞的培养条件进行探索,并在此基础上对MC1R基因进行克隆,为后续研究黄颡鱼黑色素异常的细胞及分子机理研究提供基础.结果表明,黄颡鱼表皮黑色素细胞在27℃培养条件下,72 h开始贴壁生长,培养基中添加20%小牛血清培养效果比添加10%小牛血清好.此外,我们对黄颡鱼MC1R基因进行克隆.MC1R基因克隆方面,黄颡鱼MC1R基因全长为936 bp,编码312个氨基酸,与剑尾鱼(Xiphophorus maculates)、孔雀鱼(Poecilia reticula-ta)、条斑星鲽(Verasper moseri)、海鲈(Dicentrarchus labrax)、大菱鲆(Psetta maxima)等5种鱼类MClR基因的同源性分别为97%、96%、90%、90%、90%,系统分析结果显示,黄颡鱼MClR基因在进化树上的位置与黄颡鱼的分类所处位置基本吻合.黄颡鱼表皮黑色素细胞原代培养的条件为:27℃,添加20%小牛血清,所克隆基因为黄颡鱼MC1R基因.本研究为后续研究黄颡鱼黑色素异常的细胞及分子机理研究提供基础.
黑素皮質素受體-1(MC1R)在魚體中對黑色素細胞的分化及遷移起主要的調控作用,而且在神經繫統和免疫繫統中均錶現齣重要的生理功能.本研究對黃顙魚錶皮黑色素細胞的培養條件進行探索,併在此基礎上對MC1R基因進行剋隆,為後續研究黃顙魚黑色素異常的細胞及分子機理研究提供基礎.結果錶明,黃顙魚錶皮黑色素細胞在27℃培養條件下,72 h開始貼壁生長,培養基中添加20%小牛血清培養效果比添加10%小牛血清好.此外,我們對黃顙魚MC1R基因進行剋隆.MC1R基因剋隆方麵,黃顙魚MC1R基因全長為936 bp,編碼312箇氨基痠,與劍尾魚(Xiphophorus maculates)、孔雀魚(Poecilia reticula-ta)、條斑星鰈(Verasper moseri)、海鱸(Dicentrarchus labrax)、大蔆鲆(Psetta maxima)等5種魚類MClR基因的同源性分彆為97%、96%、90%、90%、90%,繫統分析結果顯示,黃顙魚MClR基因在進化樹上的位置與黃顙魚的分類所處位置基本吻閤.黃顙魚錶皮黑色素細胞原代培養的條件為:27℃,添加20%小牛血清,所剋隆基因為黃顙魚MC1R基因.本研究為後續研究黃顙魚黑色素異常的細胞及分子機理研究提供基礎.
흑소피질소수체-1(MC1R)재어체중대흑색소세포적분화급천이기주요적조공작용,이차재신경계통화면역계통중균표현출중요적생리공능.본연구대황상어표피흑색소세포적배양조건진행탐색,병재차기출상대MC1R기인진행극륭,위후속연구황상어흑색소이상적세포급분자궤리연구제공기출.결과표명,황상어표피흑색소세포재27℃배양조건하,72 h개시첩벽생장,배양기중첨가20%소우혈청배양효과비첨가10%소우혈청호.차외,아문대황상어MC1R기인진행극륭.MC1R기인극륭방면,황상어MC1R기인전장위936 bp,편마312개안기산,여검미어(Xiphophorus maculates)、공작어(Poecilia reticula-ta)、조반성접(Verasper moseri)、해로(Dicentrarchus labrax)、대릉평(Psetta maxima)등5충어류MClR기인적동원성분별위97%、96%、90%、90%、90%,계통분석결과현시,황상어MClR기인재진화수상적위치여황상어적분류소처위치기본문합.황상어표피흑색소세포원대배양적조건위:27℃,첨가20%소우혈청,소극륭기인위황상어MC1R기인.본연구위후속연구황상어흑색소이상적세포급분자궤리연구제공기출.