昆明理工大学学报(自然科学版)
昆明理工大學學報(自然科學版)
곤명리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF KUNMING UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(SCIENCE AND TECHNOLOGY)
2014年
6期
82-88
,共7页
张金阳%李贞景%宋玉竹%韩芹芹%夏雪山
張金暘%李貞景%宋玉竹%韓芹芹%夏雪山
장금양%리정경%송옥죽%한근근%하설산
狂犬病毒%磷蛋白%抗原表位%真核表达
狂犬病毒%燐蛋白%抗原錶位%真覈錶達
광견병독%린단백%항원표위%진핵표체
Rabies virus%phosphoprotein%antigenic epitopes%eukaryotic expression
为了探讨运用蛋白全长和多肽抗原制备抗狂犬病毒磷蛋白抗体的可能性,本研究运用生物信息学专业软件对二级结构、表面可及性、亲水性和抗原指数进行综合分析,并预测出狂犬病毒磷蛋白的抗原表位。分析结果表明,抗原表位主要位于狂犬病毒磷蛋白的区段14-37、39-66、70-91、106-114、134-158、161-173、187-201、207-221、229-234、236-244、249-258、278-297及以上区段附近。同时,本研究构建了狂犬病毒磷蛋白基因的真核表达载体,转染细胞进行真核表达后,能够被抗狂犬病毒阳性血清所识别,说明磷蛋白上存在大量有效的抗原表位。多个参数对狂犬病毒磷蛋白的抗原表位的预测,为进一步开展狂犬病毒磷蛋白的单克隆抗体制备、结构特征以及表位鉴定工作奠定理论基础。
為瞭探討運用蛋白全長和多肽抗原製備抗狂犬病毒燐蛋白抗體的可能性,本研究運用生物信息學專業軟件對二級結構、錶麵可及性、親水性和抗原指數進行綜閤分析,併預測齣狂犬病毒燐蛋白的抗原錶位。分析結果錶明,抗原錶位主要位于狂犬病毒燐蛋白的區段14-37、39-66、70-91、106-114、134-158、161-173、187-201、207-221、229-234、236-244、249-258、278-297及以上區段附近。同時,本研究構建瞭狂犬病毒燐蛋白基因的真覈錶達載體,轉染細胞進行真覈錶達後,能夠被抗狂犬病毒暘性血清所識彆,說明燐蛋白上存在大量有效的抗原錶位。多箇參數對狂犬病毒燐蛋白的抗原錶位的預測,為進一步開展狂犬病毒燐蛋白的單剋隆抗體製備、結構特徵以及錶位鑒定工作奠定理論基礎。
위료탐토운용단백전장화다태항원제비항광견병독린단백항체적가능성,본연구운용생물신식학전업연건대이급결구、표면가급성、친수성화항원지수진행종합분석,병예측출광견병독린단백적항원표위。분석결과표명,항원표위주요위우광견병독린단백적구단14-37、39-66、70-91、106-114、134-158、161-173、187-201、207-221、229-234、236-244、249-258、278-297급이상구단부근。동시,본연구구건료광견병독린단백기인적진핵표체재체,전염세포진행진핵표체후,능구피항광견병독양성혈청소식별,설명린단백상존재대량유효적항원표위。다개삼수대광견병독린단백적항원표위적예측,위진일보개전광견병독린단백적단극륭항체제비、결구특정이급표위감정공작전정이론기출。
To explore the possibility of preparing the antibody against phosphoprotein of rabies virus with poly-peptide antigen and full length phosphoprotein,bioinformatics software is used to analyze the secondary struc-ture,surface accessibility,solubility and epitopes,and antigenicity of RABV phosphoprotein is predicted.The results show that the epitopes are mainly located in the section of the rabies virus phosphoprotein 14-37,39-66, 70-91,106-114,134-158,161 -173,187 -201,207 -221,229 -234,236 -244,249 -258,278 -297 and the nearby sites of the above region.Meanwhile,eukaryotic expression vector of rabies virus phosphoprotein gene is also constructed and transfected into cells,the expression of phosphoprotein could be identified by positive serum.This demonstrates that there are a large number of effective epitopes on phosphoprotein.Prediction epitopes on the rabies virus phosphoprotein by multiple parameters will lay the theoretical foundation for further characteriza-tion of phosphoprotein structural features,monoclonal antibody production and epitopes identification.