生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2014年
6期
765-769
,共5页
赵靖凯%王聪%张籍鹏%厉建中
趙靖凱%王聰%張籍鵬%厲建中
조정개%왕총%장적붕%려건중
ZNF24%c-Myc%GST-pulldown
ZNF24%c-Myc%GST-pulldown
ZNF24%c-Myc%GST-pulldown
ZNF24%c-Myc%GST-pulldown
目的:前期酵母双杂交实验中,我们以转录因子ZNF24的SCAN结构域为诱饵,筛选到的一个阳性克隆为原癌基因c-Myc,在此进一步验证ZNF24与c-Myc间的相互作用。方法:将ZNF24与c-Myc分别构建到pGEX-4T-2和pcDNA3.1表达载体上,利用GST-pulldown技术体外验证两者表达蛋白的相互作用。结果:电泳鉴定与测序分析表明目的基因克隆正确,载体构建成功;用GST-pulldown技术检测到ZNF24与c-Myc相互作用的蛋白条带。结论:GST-pulldown实验进一步表明ZNF24与c-Myc的相互作用,为验证ZNF24与c-Myc之间存在相互作用奠定了基础。
目的:前期酵母雙雜交實驗中,我們以轉錄因子ZNF24的SCAN結構域為誘餌,篩選到的一箇暘性剋隆為原癌基因c-Myc,在此進一步驗證ZNF24與c-Myc間的相互作用。方法:將ZNF24與c-Myc分彆構建到pGEX-4T-2和pcDNA3.1錶達載體上,利用GST-pulldown技術體外驗證兩者錶達蛋白的相互作用。結果:電泳鑒定與測序分析錶明目的基因剋隆正確,載體構建成功;用GST-pulldown技術檢測到ZNF24與c-Myc相互作用的蛋白條帶。結論:GST-pulldown實驗進一步錶明ZNF24與c-Myc的相互作用,為驗證ZNF24與c-Myc之間存在相互作用奠定瞭基礎。
목적:전기효모쌍잡교실험중,아문이전록인자ZNF24적SCAN결구역위유이,사선도적일개양성극륭위원암기인c-Myc,재차진일보험증ZNF24여c-Myc간적상호작용。방법:장ZNF24여c-Myc분별구건도pGEX-4T-2화pcDNA3.1표체재체상,이용GST-pulldown기술체외험증량자표체단백적상호작용。결과:전영감정여측서분석표명목적기인극륭정학,재체구건성공;용GST-pulldown기술검측도ZNF24여c-Myc상호작용적단백조대。결론:GST-pulldown실험진일보표명ZNF24여c-Myc적상호작용,위험증ZNF24여c-Myc지간존재상호작용전정료기출。
Objective: In the previous yeast two-hybrid experiment, we used the SACN domain of transcription factor ZNF24 as bait and screened a clone including proto-oncogene c-Myc. To further verify the interaction of transcription factors ZNF24 and c-Myc. Methods: Through gene cloning and carrier construction technology ZNF24 and c-Myc were built into the different expression vector, the GST-pulldown technology was used to verify interactions of both expressed protein in vitro. Results: Electrophoresis appraisal and sequencing analysis showed that gene cloning right and carrier to build success, GST-pulldown successfully detected ZNF24 interact with c-Myc protein bands. Conclusion: GST-pulldown verified the interaction of ZNF24 and c-Myc in vitro.