胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2014年
11期
1305-1308
,共4页
应佳丽%王雪玲%范丽娇%张少艳
應佳麗%王雪玲%範麗嬌%張少豔
응가려%왕설령%범려교%장소염
酸性成纤维细胞生长因子%肝细胞生长因子%胚胎干细胞%甲胎蛋白%白蛋白%细胞角蛋白8%细胞角蛋白18
痠性成纖維細胞生長因子%肝細胞生長因子%胚胎榦細胞%甲胎蛋白%白蛋白%細胞角蛋白8%細胞角蛋白18
산성성섬유세포생장인자%간세포생장인자%배태간세포%갑태단백%백단백%세포각단백8%세포각단백18
Acid fibroblast growth factor%Hepatocyte growth factor%Embryonic stem cell%Alpha fetoprotein%Alblumin%CK8%CK18
目的 观察酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor,aFGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)体外定向诱导分化作用及诱导后肝细胞标志物的表达水平.方法 体外培养小鼠ESC使其发育成拟胚体,然后加入aFGF、HGF诱导ESC定向分化成肝细胞.收集培养上清液,RIA法测定甲胎蛋白(alpha fetopro-tein,AFP)、白蛋白(albumin,A LB)浓度.PCR和免疫印迹法检测ALB、细胞角蛋白8(CK8)以及细胞角蛋白18(CK18)在细胞内mRNA和蛋白表达水平.结果 ESC培养5d后发育成为拟胚体,加入不同浓度aFGF继续培养,5d后AFP浓度降低,ALB浓度升高,与对照组相比有显著性差异.细胞内ALB、CK8及CK18表达水平明显升高.一次诱导后加入HGF,继续诱导5d,上清液中AFP浓度降低,ALB浓度升高,具有浓度依赖性.ALB、CK8及CK18在细胞内表达升高.结论 体外培养小鼠ESC,加入aFGF、HGF后可诱导其向肝细胞定向分化.肝细胞标志物AFP水平明显降低,ALB、CK8以及CK18表达水平明显升高.
目的 觀察痠性成纖維細胞生長因子(acid fibroblast growth factor,aFGF)、肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)對小鼠胚胎榦細胞(embryonic stem cell,ESC)體外定嚮誘導分化作用及誘導後肝細胞標誌物的錶達水平.方法 體外培養小鼠ESC使其髮育成擬胚體,然後加入aFGF、HGF誘導ESC定嚮分化成肝細胞.收集培養上清液,RIA法測定甲胎蛋白(alpha fetopro-tein,AFP)、白蛋白(albumin,A LB)濃度.PCR和免疫印跡法檢測ALB、細胞角蛋白8(CK8)以及細胞角蛋白18(CK18)在細胞內mRNA和蛋白錶達水平.結果 ESC培養5d後髮育成為擬胚體,加入不同濃度aFGF繼續培養,5d後AFP濃度降低,ALB濃度升高,與對照組相比有顯著性差異.細胞內ALB、CK8及CK18錶達水平明顯升高.一次誘導後加入HGF,繼續誘導5d,上清液中AFP濃度降低,ALB濃度升高,具有濃度依賴性.ALB、CK8及CK18在細胞內錶達升高.結論 體外培養小鼠ESC,加入aFGF、HGF後可誘導其嚮肝細胞定嚮分化.肝細胞標誌物AFP水平明顯降低,ALB、CK8以及CK18錶達水平明顯升高.
목적 관찰산성성섬유세포생장인자(acid fibroblast growth factor,aFGF)、간세포생장인자(hepatocyte growth factor,HGF)대소서배태간세포(embryonic stem cell,ESC)체외정향유도분화작용급유도후간세포표지물적표체수평.방법 체외배양소서ESC사기발육성의배체,연후가입aFGF、HGF유도ESC정향분화성간세포.수집배양상청액,RIA법측정갑태단백(alpha fetopro-tein,AFP)、백단백(albumin,A LB)농도.PCR화면역인적법검측ALB、세포각단백8(CK8)이급세포각단백18(CK18)재세포내mRNA화단백표체수평.결과 ESC배양5d후발육성위의배체,가입불동농도aFGF계속배양,5d후AFP농도강저,ALB농도승고,여대조조상비유현저성차이.세포내ALB、CK8급CK18표체수평명현승고.일차유도후가입HGF,계속유도5d,상청액중AFP농도강저,ALB농도승고,구유농도의뢰성.ALB、CK8급CK18재세포내표체승고.결론 체외배양소서ESC,가입aFGF、HGF후가유도기향간세포정향분화.간세포표지물AFP수평명현강저,ALB、CK8이급CK18표체수평명현승고.
