中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS
2014年
12期
1128-1134
,共7页
袁天杰%谢丽萍%朱宝泉%胡又佳
袁天傑%謝麗萍%硃寶泉%鬍又佳
원천걸%사려평%주보천%호우가
柔红霉素%基因组文库%基因打靶%基因敲除
柔紅黴素%基因組文庫%基因打靶%基因敲除
유홍매소%기인조문고%기인타파%기인고제
daunorubicin biosynthetic cluster%genomic library%PCR-targeting%gene disruption
本研究通过构建柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus DM的基因组文库,获得2 230个重组克隆.利用菌落原位杂交和PCR筛选获得黏粒Cosmid 8-22,其插入片段大小为41 431 bp,含36个完整的开放阅读框,基本包含了完整的柔红霉素生物合成基因簇.利用黏粒Cosmid 8-22成功构建了基因打靶系统,同时敲除部分dauW和完整的dnrX基因.HPLC结果显示,敲除突变株的柔红霉素产量较出发菌提高了3～4倍.
本研究通過構建柔紅黴素產生菌天藍淡紅鏈黴菌Streptomyces coeruleorubidus DM的基因組文庫,穫得2 230箇重組剋隆.利用菌落原位雜交和PCR篩選穫得黏粒Cosmid 8-22,其插入片段大小為41 431 bp,含36箇完整的開放閱讀框,基本包含瞭完整的柔紅黴素生物閤成基因簇.利用黏粒Cosmid 8-22成功構建瞭基因打靶繫統,同時敲除部分dauW和完整的dnrX基因.HPLC結果顯示,敲除突變株的柔紅黴素產量較齣髮菌提高瞭3～4倍.
본연구통과구건유홍매소산생균천람담홍련매균Streptomyces coeruleorubidus DM적기인조문고,획득2 230개중조극륭.이용균락원위잡교화PCR사선획득점립Cosmid 8-22,기삽입편단대소위41 431 bp,함36개완정적개방열독광,기본포함료완정적유홍매소생물합성기인족.이용점립Cosmid 8-22성공구건료기인타파계통,동시고제부분dauW화완정적dnrX기인.HPLC결과현시,고제돌변주적유홍매소산량교출발균제고료3～4배.
