CAJ | 학술논문

目的：制备RPL8蛋白冲击的树突状细胞。方法构建重组原核表达载体pET28a(+)-RPL8,IPTG诱导RPL8融合蛋白表达,RPL8蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定；分离小鼠骨髓细胞,经rmGM-CSF、rmIL-4体外诱导培养DC,流式细胞仪检测DC表面标志；RPL8蛋白致敏DC后,采用荧光标记抗体荧光显微镜下观察细胞RPL8负载情况。结果经双酶切及PCR鉴定可见大小<774bp的条带,纯化蛋白经Western blot分析见28kD大小的特异性条带；体外培养的DC具有典型的树突状结构,流式细胞仪检测细胞高表达CD11C、CD80、MHC-玉类、MHC-Ⅱ类分子,RPL8蛋白致敏DC后,DC见绿色荧光。结论成功制备RPL8蛋白冲击的DC疫苗,为进一步黑色素瘤免疫治疗研究提供基础。
목적：제비RPL8단백충격적수돌상세포。방법구건중조원핵표체재체pET28a(+)-RPL8,IPTG유도RPL8융합단백표체,RPL8단백순화후용SDS-PAGE급Western blot진행감정；분리소서골수세포,경rmGM-CSF、rmIL-4체외유도배양DC,류식세포의검측DC표면표지；RPL8단백치민DC후,채용형광표기항체형광현미경하관찰세포RPL8부재정황。결과경쌍매절급PCR감정가견대소<774bp적조대,순화단백경Western blot분석견28kD대소적특이성조대；체외배양적DC구유전형적수돌상결구,류식세포의검측세포고표체CD11C、CD80、MHC-옥류、MHC-Ⅱ류분자,RPL8단백치민DC후,DC견록색형광。결론성공제비RPL8단백충격적DC역묘,위진일보흑색소류면역치료연구제공기출。