复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2014年
6期
711-719
,共9页
张冰莹%方艺%焦晓燕%刘春凤%储以微%邹建洲%丁小强
張冰瑩%方藝%焦曉燕%劉春鳳%儲以微%鄒建洲%丁小彊
장빙형%방예%초효연%류춘봉%저이미%추건주%정소강
缺血预适应(IPC)%急性肾损伤(AKI)%调节性T细胞(Treg)%半乳糖凝集素-9(Gal-9)
缺血預適應(IPC)%急性腎損傷(AKI)%調節性T細胞(Treg)%半乳糖凝集素-9(Gal-9)
결혈예괄응(IPC)%급성신손상(AKI)%조절성T세포(Treg)%반유당응집소-9(Gal-9)
ischemia preconditioning (IPC)%acute kidney injury (AKI)%regulatory T cells (Treg)%galectin-9 (Gal-9)
目的 研究晚期缺血预适应(ischemic preconditioning,IPC)联合半乳糖凝集素-9(galectin-9,Gal-9)对小鼠肾脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的预防作用及可能的机制.方法 75只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组.(1)IR组:d1仅分离两侧肾蒂,不进行预缺血,d5夹闭两侧肾蒂造成缺血35 min.(2)IPC-IR组:d1夹闭两侧肾蒂造成18 min预缺血,d2～d5每天PBS皮下注射,d5给药后立即夹闭两侧肾蒂造成缺血35min.(3) IPC-Gal9-IR组:d1夹闭两侧肾蒂造成18 min预缺血,d2～d5每天给予Gal-9 5 μg皮下注射,并于d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35 rmin.(4) IPC-Gal9-PC61-IR组.:d1夹闭两侧肾蒂造成18 min预缺血,d2～d5每天给予Gal-9 5 μg皮下注射,d3和d5分别给予调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)特异性拮抗剂PC61腹腔注射200 μg,并在d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35 min.(5) sham-sham组:不进行预适应,不给药,不给予IR损伤.以上5组于IR或第2次sham术后24h、72h和7天取样评价肾功能,并采用流式细胞术比较外周血、脾脏和肾脏中Treg的表达量和肾脏固有免疫系统反应程度及炎性因子的分泌.结果 缺血再灌注24h及72h小鼠血肌酐IPC-IR组显著低于IR组(P＜0.01),同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组(P＜0.05),而给予Treg特异性拮抗剂的IPC-Gal9-PC61-IR组与IR组差异无统计学意义(P＞0.05).缺血再灌注24 h肾小管间质损伤指数IPC-IR组显著低于IR组(P＜0.05),同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组(P＜0.05).IPC-Gal9-IR组肾脏局部中心粒细胞浸润减轻(P＜0.05)且CD4+T细胞分泌的IFN-γ减少(P＜0.05).IPC-Gal9-IR组外周血、脾脏和肾脏Treg占CD4+T细胞的比例较IR组显著升高(P＜0.05).结论 晚期IPC联合Gal-9干预对小鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用优于单纯缺血预适应,可能与系统上调Treg表达有关.
目的 研究晚期缺血預適應(ischemic preconditioning,IPC)聯閤半乳糖凝集素-9(galectin-9,Gal-9)對小鼠腎髒缺血再灌註(ischemia reperfusion,IR)損傷的預防作用及可能的機製.方法 75隻雄性C57BL/6N小鼠隨機分為5組.(1)IR組:d1僅分離兩側腎蒂,不進行預缺血,d5夾閉兩側腎蒂造成缺血35 min.(2)IPC-IR組:d1夾閉兩側腎蒂造成18 min預缺血,d2～d5每天PBS皮下註射,d5給藥後立即夾閉兩側腎蒂造成缺血35min.(3) IPC-Gal9-IR組:d1夾閉兩側腎蒂造成18 min預缺血,d2～d5每天給予Gal-9 5 μg皮下註射,併于d5給藥後夾閉兩側腎蒂造成缺血35 rmin.(4) IPC-Gal9-PC61-IR組.:d1夾閉兩側腎蒂造成18 min預缺血,d2～d5每天給予Gal-9 5 μg皮下註射,d3和d5分彆給予調節性T細胞(regulatory T cells,Treg)特異性拮抗劑PC61腹腔註射200 μg,併在d5給藥後夾閉兩側腎蒂造成缺血35 min.(5) sham-sham組:不進行預適應,不給藥,不給予IR損傷.以上5組于IR或第2次sham術後24h、72h和7天取樣評價腎功能,併採用流式細胞術比較外週血、脾髒和腎髒中Treg的錶達量和腎髒固有免疫繫統反應程度及炎性因子的分泌.結果 缺血再灌註24h及72h小鼠血肌酐IPC-IR組顯著低于IR組(P＜0.01),同時IPC-Gal9-IR組顯著低于IPC-IR組(P＜0.05),而給予Treg特異性拮抗劑的IPC-Gal9-PC61-IR組與IR組差異無統計學意義(P＞0.05).缺血再灌註24 h腎小管間質損傷指數IPC-IR組顯著低于IR組(P＜0.05),同時IPC-Gal9-IR組顯著低于IPC-IR組(P＜0.05).IPC-Gal9-IR組腎髒跼部中心粒細胞浸潤減輕(P＜0.05)且CD4+T細胞分泌的IFN-γ減少(P＜0.05).IPC-Gal9-IR組外週血、脾髒和腎髒Treg佔CD4+T細胞的比例較IR組顯著升高(P＜0.05).結論 晚期IPC聯閤Gal-9榦預對小鼠缺血再灌註腎損傷的保護作用優于單純缺血預適應,可能與繫統上調Treg錶達有關.
목적 연구만기결혈예괄응(ischemic preconditioning,IPC)연합반유당응집소-9(galectin-9,Gal-9)대소서신장결혈재관주(ischemia reperfusion,IR)손상적예방작용급가능적궤제.방법 75지웅성C57BL/6N소서수궤분위5조.(1)IR조:d1부분리량측신체,불진행예결혈,d5협폐량측신체조성결혈35 min.(2)IPC-IR조:d1협폐량측신체조성18 min예결혈,d2～d5매천PBS피하주사,d5급약후립즉협폐량측신체조성결혈35min.(3) IPC-Gal9-IR조:d1협폐량측신체조성18 min예결혈,d2～d5매천급여Gal-9 5 μg피하주사,병우d5급약후협폐량측신체조성결혈35 rmin.(4) IPC-Gal9-PC61-IR조.:d1협폐량측신체조성18 min예결혈,d2～d5매천급여Gal-9 5 μg피하주사,d3화d5분별급여조절성T세포(regulatory T cells,Treg)특이성길항제PC61복강주사200 μg,병재d5급약후협폐량측신체조성결혈35 min.(5) sham-sham조:불진행예괄응,불급약,불급여IR손상.이상5조우IR혹제2차sham술후24h、72h화7천취양평개신공능,병채용류식세포술비교외주혈、비장화신장중Treg적표체량화신장고유면역계통반응정도급염성인자적분비.결과 결혈재관주24h급72h소서혈기항IPC-IR조현저저우IR조(P＜0.01),동시IPC-Gal9-IR조현저저우IPC-IR조(P＜0.05),이급여Treg특이성길항제적IPC-Gal9-PC61-IR조여IR조차이무통계학의의(P＞0.05).결혈재관주24 h신소관간질손상지수IPC-IR조현저저우IR조(P＜0.05),동시IPC-Gal9-IR조현저저우IPC-IR조(P＜0.05).IPC-Gal9-IR조신장국부중심립세포침윤감경(P＜0.05)차CD4+T세포분비적IFN-γ감소(P＜0.05).IPC-Gal9-IR조외주혈、비장화신장Treg점CD4+T세포적비례교IR조현저승고(P＜0.05).결론 만기IPC연합Gal-9간예대소서결혈재관주신손상적보호작용우우단순결혈예괄응,가능여계통상조Treg표체유관.
