中国心血管病研究
中國心血管病研究
중국심혈관병연구
CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REVIEW
2014年
12期
1127-1132,1151-1152
,共8页
刘晓波%杨啸%姚艳玲%张倩%焦向英
劉曉波%楊嘯%姚豔玲%張倩%焦嚮英
류효파%양소%요염령%장천%초향영
硫氧还蛋白%硫氧还蛋白相互作用蛋白%胰岛细胞%凋亡%突变
硫氧還蛋白%硫氧還蛋白相互作用蛋白%胰島細胞%凋亡%突變
류양환단백%류양환단백상호작용단백%이도세포%조망%돌변
Thioredoxin%Thioredoxin-interacting protein%Islet cells%Apoptosis%Mutation
目的 观察TXNIP过表达是否可以引起正常培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡,分析TXNIP引起细胞损伤和凋亡的下游途径,以进一步明确TXNIP在糖尿病中引起各器官细胞损伤的机制.方法 将使用正常糖脂浓度培养的胰岛细胞分为4组:正常培养组、Ad-eGFP空病毒组、Ad-TXNIP过表达组和Ad-TXNIPC247S点突变过表达组.结果 与Ad-eGFP空病毒组相比,两个过表达组的TXNIP mRNA水平、TXNIP蛋白水平均显著升高,表明病毒转染成功,TXNIP成功过表达.与空病毒组相比,Ad-TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量升高(1.67±0.08比1.06±0.05,P＜0.05),而Trx活性显著降低(0.42±0.11比1.13±0.14,P＜0.01);LDH活性[(498.8±55.62)U/L比(266.2±36.49)U/L,P＜0.01]、caspase-3活性[(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro比(0.979±0.100)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]及p38激酶活性(2.45±0.22比1.10±0.08,P＜0.01)均显著增高.与Ad-TXNIP过表达组相比,C247S点突变的TXNIP过表达组TXNIP与Trx的结合量减少,Trx活性明显升高,LDH活性[(421.6±41.31)U/L比(498.8±55.62)U/L,P＜0.05]和caspase-3活性[(3.377±0.290)nmol·h-1·mg-1 pro比(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]较低,p38激酶活性(0.80±0.07比2.45±0.22,P＞0.05)明显降低.结论 单纯过表达TXNIP可以引起正常糖脂浓度培养条件下的胰岛细胞发生损伤和凋亡.TXNIP介导细胞损伤和凋亡的机制一方面与其抑制Trx活性、增加自由基损伤、增加ASK1-p38激酶依赖的凋亡途径有关,同时也有不依赖结合抑制Trx的途径存在.TXNIP的表达上调是糖尿病引起胰岛细胞损伤和凋亡的重要原因.
目的 觀察TXNIP過錶達是否可以引起正常培養條件下的胰島細胞髮生損傷和凋亡,分析TXNIP引起細胞損傷和凋亡的下遊途徑,以進一步明確TXNIP在糖尿病中引起各器官細胞損傷的機製.方法 將使用正常糖脂濃度培養的胰島細胞分為4組:正常培養組、Ad-eGFP空病毒組、Ad-TXNIP過錶達組和Ad-TXNIPC247S點突變過錶達組.結果 與Ad-eGFP空病毒組相比,兩箇過錶達組的TXNIP mRNA水平、TXNIP蛋白水平均顯著升高,錶明病毒轉染成功,TXNIP成功過錶達.與空病毒組相比,Ad-TXNIP過錶達組TXNIP與Trx的結閤量升高(1.67±0.08比1.06±0.05,P＜0.05),而Trx活性顯著降低(0.42±0.11比1.13±0.14,P＜0.01);LDH活性[(498.8±55.62)U/L比(266.2±36.49)U/L,P＜0.01]、caspase-3活性[(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro比(0.979±0.100)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]及p38激酶活性(2.45±0.22比1.10±0.08,P＜0.01)均顯著增高.與Ad-TXNIP過錶達組相比,C247S點突變的TXNIP過錶達組TXNIP與Trx的結閤量減少,Trx活性明顯升高,LDH活性[(421.6±41.31)U/L比(498.8±55.62)U/L,P＜0.05]和caspase-3活性[(3.377±0.290)nmol·h-1·mg-1 pro比(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]較低,p38激酶活性(0.80±0.07比2.45±0.22,P＞0.05)明顯降低.結論 單純過錶達TXNIP可以引起正常糖脂濃度培養條件下的胰島細胞髮生損傷和凋亡.TXNIP介導細胞損傷和凋亡的機製一方麵與其抑製Trx活性、增加自由基損傷、增加ASK1-p38激酶依賴的凋亡途徑有關,同時也有不依賴結閤抑製Trx的途徑存在.TXNIP的錶達上調是糖尿病引起胰島細胞損傷和凋亡的重要原因.
목적 관찰TXNIP과표체시부가이인기정상배양조건하적이도세포발생손상화조망,분석TXNIP인기세포손상화조망적하유도경,이진일보명학TXNIP재당뇨병중인기각기관세포손상적궤제.방법 장사용정상당지농도배양적이도세포분위4조:정상배양조、Ad-eGFP공병독조、Ad-TXNIP과표체조화Ad-TXNIPC247S점돌변과표체조.결과 여Ad-eGFP공병독조상비,량개과표체조적TXNIP mRNA수평、TXNIP단백수평균현저승고,표명병독전염성공,TXNIP성공과표체.여공병독조상비,Ad-TXNIP과표체조TXNIP여Trx적결합량승고(1.67±0.08비1.06±0.05,P＜0.05),이Trx활성현저강저(0.42±0.11비1.13±0.14,P＜0.01);LDH활성[(498.8±55.62)U/L비(266.2±36.49)U/L,P＜0.01]、caspase-3활성[(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro비(0.979±0.100)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]급p38격매활성(2.45±0.22비1.10±0.08,P＜0.01)균현저증고.여Ad-TXNIP과표체조상비,C247S점돌변적TXNIP과표체조TXNIP여Trx적결합량감소,Trx활성명현승고,LDH활성[(421.6±41.31)U/L비(498.8±55.62)U/L,P＜0.05]화caspase-3활성[(3.377±0.290)nmol·h-1·mg-1 pro비(3.799±0.330)nmol·h-1·mg-1 pro,P＜0.01]교저,p38격매활성(0.80±0.07비2.45±0.22,P＞0.05)명현강저.결론 단순과표체TXNIP가이인기정상당지농도배양조건하적이도세포발생손상화조망.TXNIP개도세포손상화조망적궤제일방면여기억제Trx활성、증가자유기손상、증가ASK1-p38격매의뢰적조망도경유관,동시야유불의뢰결합억제Trx적도경존재.TXNIP적표체상조시당뇨병인기이도세포손상화조망적중요원인.
