中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
12期
966-970
,共5页
王臣%郭香玲%李小康%汪洋%张春杰%吴庭才%李德元%陈溥言
王臣%郭香玲%李小康%汪洋%張春傑%吳庭纔%李德元%陳溥言
왕신%곽향령%리소강%왕양%장춘걸%오정재%리덕원%진부언
法氏囊%活性五肽%噬菌体随机肽库%抗肿瘤%结合肽
法氏囊%活性五肽%噬菌體隨機肽庫%抗腫瘤%結閤肽
법씨낭%활성오태%서균체수궤태고%항종류%결합태
bursa of Fabricius%Bursopentin%phage-displayed random peptide library%anti-tumor%binding peptides
为鉴定与具有免疫调节功能和抗肿瘤潜能的法氏囊活性五肽(BP5)特异性结合的多肽,本研究利用噬菌体展示技术,以BP5-BSA为靶分子,对噬菌体随机12肽库进行4轮亲和筛选,结合ELISA鉴定和竞争抑制试验,筛选出3个能够特异性与BP5结合的噬菌体阳性克隆.测序结果显示,其编码的12肽序列分别为:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)和MSSTLNGMLNSL(P7-12),其核心基序为TLNXM.通过人工合成P2-12、P6-12、P7-12多肽,并采用MTT法检测其对BP5抗肿瘤细胞增殖能力的影响,结果显示,P2-12和P7-12肽在0.2 μg/mL～20 μg/mL浓度下,P6-12肽在2μg/mL～20 μg/mL浓度下均能够抑制BP5抗小鼠WEHI-231 B淋巴瘤细胞增殖作用,其中P2-12在20 μg/mL浓度下抑制作用最为显著(p＜0.01).此外,p53荧光素酶活性检测结果显示,这3种BP5结合肽在实验浓度下均能够下调BP5促p53基因转录的活性.以上结果表明,这3种BP5特异性结合肽具有下调BP5抗肿瘤活性.本研究为进一步研究BP5抗肿瘤细胞增殖作用的机制提供了相关的实验依据.
為鑒定與具有免疫調節功能和抗腫瘤潛能的法氏囊活性五肽(BP5)特異性結閤的多肽,本研究利用噬菌體展示技術,以BP5-BSA為靶分子,對噬菌體隨機12肽庫進行4輪親和篩選,結閤ELISA鑒定和競爭抑製試驗,篩選齣3箇能夠特異性與BP5結閤的噬菌體暘性剋隆.測序結果顯示,其編碼的12肽序列分彆為:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)和MSSTLNGMLNSL(P7-12),其覈心基序為TLNXM.通過人工閤成P2-12、P6-12、P7-12多肽,併採用MTT法檢測其對BP5抗腫瘤細胞增殖能力的影響,結果顯示,P2-12和P7-12肽在0.2 μg/mL～20 μg/mL濃度下,P6-12肽在2μg/mL～20 μg/mL濃度下均能夠抑製BP5抗小鼠WEHI-231 B淋巴瘤細胞增殖作用,其中P2-12在20 μg/mL濃度下抑製作用最為顯著(p＜0.01).此外,p53熒光素酶活性檢測結果顯示,這3種BP5結閤肽在實驗濃度下均能夠下調BP5促p53基因轉錄的活性.以上結果錶明,這3種BP5特異性結閤肽具有下調BP5抗腫瘤活性.本研究為進一步研究BP5抗腫瘤細胞增殖作用的機製提供瞭相關的實驗依據.
위감정여구유면역조절공능화항종류잠능적법씨낭활성오태(BP5)특이성결합적다태,본연구이용서균체전시기술,이BP5-BSA위파분자,대서균체수궤12태고진행4륜친화사선,결합ELISA감정화경쟁억제시험,사선출3개능구특이성여BP5결합적서균체양성극륭.측서결과현시,기편마적12태서렬분별위:PINMQTLNCMAA(P2-12)、GCTLNPMSDLLG(P6-12)화MSSTLNGMLNSL(P7-12),기핵심기서위TLNXM.통과인공합성P2-12、P6-12、P7-12다태,병채용MTT법검측기대BP5항종류세포증식능력적영향,결과현시,P2-12화P7-12태재0.2 μg/mL～20 μg/mL농도하,P6-12태재2μg/mL～20 μg/mL농도하균능구억제BP5항소서WEHI-231 B림파류세포증식작용,기중P2-12재20 μg/mL농도하억제작용최위현저(p＜0.01).차외,p53형광소매활성검측결과현시,저3충BP5결합태재실험농도하균능구하조BP5촉p53기인전록적활성.이상결과표명,저3충BP5특이성결합태구유하조BP5항종류활성.본연구위진일보연구BP5항종류세포증식작용적궤제제공료상관적실험의거.
