中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
12期
961-965
,共5页
王善辉%李云龙%强成魁%成子强
王善輝%李雲龍%彊成魁%成子彊
왕선휘%리운룡%강성괴%성자강
DTMUV E蛋白%杆状病毒表面展示技术%免疫原性%保护效果
DTMUV E蛋白%桿狀病毒錶麵展示技術%免疫原性%保護效果
DTMUV E단백%간상병독표면전시기술%면역원성%보호효과
DTMUV E protein%baculovirus suface-display technology%immunogenicity%protective efficacy
鸭坦布苏病毒(DTMUV)为新出现的病毒,主要引起鸭的产蛋量急剧下降.为评价真核表达DTMUV的E蛋白的免疫原性,本研究利用杆状病毒表面展示技术,构建表面展示DTMUV JSXZ株E蛋白的重组杆状病毒(rBV-DTMUV-E),将其感染昆虫细胞,从而将E蛋白展示在杆状病毒的表面,并对表达的重组E蛋白(rE)的免疫原性和保护效果进行研究.经western blot和间接免疫荧光试验证明rE能够在Sf9细胞中有效表达;并且呈可溶性表达.重组蛋白经镍柱纯化,并采用氢氧化铝乳化(0.1 μg/mL),分别以0.2 mL、0.4 mL和0.6 mL的剂量免疫雏鸭,通过ELISA抗体检测结果证明,rE可以诱导产生高水平的IgG血清抗体;MTT试验结果表明,rE能够刺激T淋巴细胞增殖;攻毒保护试验结果显示,其0.2 mL组免疫保护率为80%,0.4 mL和0.6 mL组保护率均为100%,而对照组雏鸭均表现为典型的DTMUV感染症状,其中4只死亡.以上研究结果为DTMUV亚单位疫苗的研究奠定了基础.
鴨坦佈囌病毒(DTMUV)為新齣現的病毒,主要引起鴨的產蛋量急劇下降.為評價真覈錶達DTMUV的E蛋白的免疫原性,本研究利用桿狀病毒錶麵展示技術,構建錶麵展示DTMUV JSXZ株E蛋白的重組桿狀病毒(rBV-DTMUV-E),將其感染昆蟲細胞,從而將E蛋白展示在桿狀病毒的錶麵,併對錶達的重組E蛋白(rE)的免疫原性和保護效果進行研究.經western blot和間接免疫熒光試驗證明rE能夠在Sf9細胞中有效錶達;併且呈可溶性錶達.重組蛋白經鎳柱純化,併採用氫氧化鋁乳化(0.1 μg/mL),分彆以0.2 mL、0.4 mL和0.6 mL的劑量免疫雛鴨,通過ELISA抗體檢測結果證明,rE可以誘導產生高水平的IgG血清抗體;MTT試驗結果錶明,rE能夠刺激T淋巴細胞增殖;攻毒保護試驗結果顯示,其0.2 mL組免疫保護率為80%,0.4 mL和0.6 mL組保護率均為100%,而對照組雛鴨均錶現為典型的DTMUV感染癥狀,其中4隻死亡.以上研究結果為DTMUV亞單位疫苗的研究奠定瞭基礎.
압탄포소병독(DTMUV)위신출현적병독,주요인기압적산단량급극하강.위평개진핵표체DTMUV적E단백적면역원성,본연구이용간상병독표면전시기술,구건표면전시DTMUV JSXZ주E단백적중조간상병독(rBV-DTMUV-E),장기감염곤충세포,종이장E단백전시재간상병독적표면,병대표체적중조E단백(rE)적면역원성화보호효과진행연구.경western blot화간접면역형광시험증명rE능구재Sf9세포중유효표체;병차정가용성표체.중조단백경얼주순화,병채용경양화려유화(0.1 μg/mL),분별이0.2 mL、0.4 mL화0.6 mL적제량면역추압,통과ELISA항체검측결과증명,rE가이유도산생고수평적IgG혈청항체;MTT시험결과표명,rE능구자격T림파세포증식;공독보호시험결과현시,기0.2 mL조면역보호솔위80%,0.4 mL화0.6 mL조보호솔균위100%,이대조조추압균표현위전형적DTMUV감염증상,기중4지사망.이상연구결과위DTMUV아단위역묘적연구전정료기출.