H7和N9亚型及A型流感病毒多重荧光定量RT-RCR检测方法的建立
H7화N9아형급A형류감병독다중형광정량RT-RCR검측방법적건립
Establishment of multiplex real-time RT-PCR for detecting H7, N9 subtype and A type influenza virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2014年 12期 939-942 ,共4页

    徐晓龙%包红梅%马勇%施建忠%曾显营%李雁冰%王秀荣%陈化兰

    서효룡%포홍매%마용%시건충%증현영%리안빙%왕수영%진화란

    A型流感病毒%H7N9亚型流感病毒%多重TaqMan荧光定量RT-PCR A型流感病毒%H7N9亞型流感病毒%多重TaqMan熒光定量RT-PCR
    A형류감병독%H7N9아형류감병독%다중TaqMan형광정량RT-PCR
    A type influenza virus%H7N9 subtype influenza virus%multiplex TaqMan real-time RT-PCR
    为同时检测H7亚型、N9亚型和A型流感病毒,本研究根据流感病毒H7 HA、N9 NA以及M基因序列分别合成3对引物和3种荧光素标记的探针,建立了多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法.特异性试验结果显示,仅H7亚型和N9亚型病毒分别在FAM和JOE通道监测到荧光信号,而所有A型参考流感病毒株均可获得Cy5荧光信号,此外其他相关的禽源病毒检测结果均为阴性.同时,以H7N9亚型病毒RNA为模板建立了标准曲线,检测H7 HA、N9 NA以及M基因的R2值均为0.999,最低检出量均为35.4 EID50/mL.批内和批间试验的变异系数均小于1.48％.利用该方法对1 072份临床样品(咽喉和泄殖腔拭子)检测,H7N9亚型和A型流感病毒分别检出7份和23份.该方法可以有助于H7N9亚型和A型流感病毒的快速检测及鉴定.
    위동시검측H7아형、N9아형화A형류감병독,본연구근거류감병독H7 HA、N9 NA이급M기인서렬분별합성3대인물화3충형광소표기적탐침,건립료다중TaqMan형광정량RT-PCR검측방법.특이성시험결과현시,부H7아형화N9아형병독분별재FAM화JOE통도감측도형광신호,이소유A형삼고류감병독주균가획득Cy5형광신호,차외기타상관적금원병독검측결과균위음성.동시,이H7N9아형병독RNA위모판건립료표준곡선,검측H7 HA、N9 NA이급M기인적R2치균위0.999,최저검출량균위35.4 EID50/mL.비내화비간시험적변이계수균소우1.48％.이용해방법대1 072빈림상양품(인후화설식강식자)검측,H7N9아형화A형류감병독분별검출7빈화23빈.해방법가이유조우H7N9아형화A형류감병독적쾌속검측급감정.
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