中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2014年
12期
914-919
,共6页
徐逍%吴康%杨彩根%侍苗苗%宋学宏
徐逍%吳康%楊綵根%侍苗苗%宋學宏
서소%오강%양채근%시묘묘%송학굉
中华绒螯蟹%恩诺沙星%多克隆抗体%酶联免疫吸附测定
中華絨螯蟹%恩諾沙星%多剋隆抗體%酶聯免疫吸附測定
중화융오해%은낙사성%다극륭항체%매련면역흡부측정
Chinese mitten crab%Enrofloxacin (ENR)%Polyclonal antibody%Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
目的 优化人工抗原合成条件及免疫程序,制备亲和力高、特异性强及检测限低的多克隆抗体,并建立适用中华绒螯蟹中恩诺沙星残留检测的免疫学分析方法.方法 采用优化的碳二亚胺法合成免疫原(cBSA-ENR)、N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成包被抗原(cOVA-ENR)及免疫方式等技术,制备恩诺沙星多克隆抗体并用方阵ELISA及间接竞争ELISA对其滴度、亲和力及特异性进行分析,进而应用于中华绒螯蟹加标样品回收率和精密度的检测.结果 恩诺沙星多抗的工作浓度为1∶80000,IC50为8.68ng/mL,有效检测范围为0.4～125ng/mL,与环丙沙星等竞争物的交叉反应率均小于0.5％;分别在中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺样品中添加10、30和90ng/g (ng/mL)3个浓度水平的恩诺沙星,平均回收率分别为72.23％～85.45％、68.66％～74.12％和50.17％～56.30％,相对标准偏差分别为7.64％～12.26％、12.41％～22.23％和28.28％～35.40％.结论 通过优化制备技术获得恩诺沙星多克隆抗体,并建立的免疫分析方法能够满足中华绒螯蟹等水产品中恩诺沙星残留检测的基本要求.
目的 優化人工抗原閤成條件及免疫程序,製備親和力高、特異性彊及檢測限低的多剋隆抗體,併建立適用中華絨螯蟹中恩諾沙星殘留檢測的免疫學分析方法.方法 採用優化的碳二亞胺法閤成免疫原(cBSA-ENR)、N-羥基琥珀酰亞胺活性酯法閤成包被抗原(cOVA-ENR)及免疫方式等技術,製備恩諾沙星多剋隆抗體併用方陣ELISA及間接競爭ELISA對其滴度、親和力及特異性進行分析,進而應用于中華絨螯蟹加標樣品迴收率和精密度的檢測.結果 恩諾沙星多抗的工作濃度為1∶80000,IC50為8.68ng/mL,有效檢測範圍為0.4～125ng/mL,與環丙沙星等競爭物的交扠反應率均小于0.5％;分彆在中華絨螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺樣品中添加10、30和90ng/g (ng/mL)3箇濃度水平的恩諾沙星,平均迴收率分彆為72.23％～85.45％、68.66％～74.12％和50.17％～56.30％,相對標準偏差分彆為7.64％～12.26％、12.41％～22.23％和28.28％～35.40％.結論 通過優化製備技術穫得恩諾沙星多剋隆抗體,併建立的免疫分析方法能夠滿足中華絨螯蟹等水產品中恩諾沙星殘留檢測的基本要求.
목적 우화인공항원합성조건급면역정서,제비친화력고、특이성강급검측한저적다극륭항체,병건립괄용중화융오해중은낙사성잔류검측적면역학분석방법.방법 채용우화적탄이아알법합성면역원(cBSA-ENR)、N-간기호박선아알활성지법합성포피항원(cOVA-ENR)급면역방식등기술,제비은낙사성다극륭항체병용방진ELISA급간접경쟁ELISA대기적도、친화력급특이성진행분석,진이응용우중화융오해가표양품회수솔화정밀도적검측.결과 은낙사성다항적공작농도위1∶80000,IC50위8.68ng/mL,유효검측범위위0.4～125ng/mL,여배병사성등경쟁물적교차반응솔균소우0.5％;분별재중화융오해혈림파、기육、간이선양품중첨가10、30화90ng/g (ng/mL)3개농도수평적은낙사성,평균회수솔분별위72.23％～85.45％、68.66％～74.12％화50.17％～56.30％,상대표준편차분별위7.64％～12.26％、12.41％～22.23％화28.28％～35.40％.결론 통과우화제비기술획득은낙사성다극륭항체,병건립적면역분석방법능구만족중화융오해등수산품중은낙사성잔류검측적기본요구.
