中国科技论文
中國科技論文
중국과기논문
Sciencepaper Online
2014年
12期
1422-1426
,共5页
范红旗%徐宽枫%王知笑%刘晓云%周红文%杨涛
範紅旂%徐寬楓%王知笑%劉曉雲%週紅文%楊濤
범홍기%서관풍%왕지소%류효운%주홍문%양도
FTO%慢病毒%胰岛β细胞%表达谱
FTO%慢病毒%胰島β細胞%錶達譜
FTO%만병독%이도β세포%표체보
FTO%lentivirus%pancreatic isletβcells%expression profile
为了研究肥胖基因 FTO 过表达对小鼠胰岛β细胞功能的影响以及基因表达谱的变化,构建小鼠 FTO 基因过表达慢病毒载体,包装慢病毒颗粒并感染小鼠胰岛 MIN6细胞。利用 QPCR 和 Western Blot 技术检测 FTO 基因在 MIN6细胞中过表达情况,并检测葡萄糖刺激检测胰岛素的释放情况,进一步利用小鼠全基因芯片检测 FTO 过表达对小鼠胰岛 MIN6细胞表达谱的影响。结果表明:慢病毒载体成功介导了 FTO 在 MIN6细胞中过表达,FTO 过表达可以显著抑制 MIN6细胞的胰岛素释放。表达芯片的结果显示 FTO 改变 MIN6细胞表达谱,发现多达922个的差异基因。FTO 过表达改变了小鼠胰岛细胞的表达谱,差异基因通过一些重要信号通路影响小鼠胰岛β细胞的生物学功能。
為瞭研究肥胖基因 FTO 過錶達對小鼠胰島β細胞功能的影響以及基因錶達譜的變化,構建小鼠 FTO 基因過錶達慢病毒載體,包裝慢病毒顆粒併感染小鼠胰島 MIN6細胞。利用 QPCR 和 Western Blot 技術檢測 FTO 基因在 MIN6細胞中過錶達情況,併檢測葡萄糖刺激檢測胰島素的釋放情況,進一步利用小鼠全基因芯片檢測 FTO 過錶達對小鼠胰島 MIN6細胞錶達譜的影響。結果錶明:慢病毒載體成功介導瞭 FTO 在 MIN6細胞中過錶達,FTO 過錶達可以顯著抑製 MIN6細胞的胰島素釋放。錶達芯片的結果顯示 FTO 改變 MIN6細胞錶達譜,髮現多達922箇的差異基因。FTO 過錶達改變瞭小鼠胰島細胞的錶達譜,差異基因通過一些重要信號通路影響小鼠胰島β細胞的生物學功能。
위료연구비반기인 FTO 과표체대소서이도β세포공능적영향이급기인표체보적변화,구건소서 FTO 기인과표체만병독재체,포장만병독과립병감염소서이도 MIN6세포。이용 QPCR 화 Western Blot 기술검측 FTO 기인재 MIN6세포중과표체정황,병검측포도당자격검측이도소적석방정황,진일보이용소서전기인심편검측 FTO 과표체대소서이도 MIN6세포표체보적영향。결과표명:만병독재체성공개도료 FTO 재 MIN6세포중과표체,FTO 과표체가이현저억제 MIN6세포적이도소석방。표체심편적결과현시 FTO 개변 MIN6세포표체보,발현다체922개적차이기인。FTO 과표체개변료소서이도세포적표체보,차이기인통과일사중요신호통로영향소서이도β세포적생물학공능。
To explore the effect of FTO (fat mass and obesity associated)overexpression on mouse pancreatic islet βcells and genes expression profile,mouse FTO gene was cloned into the lentivirus.Lentivirus was packaged in 293T cells and delivered in-to the pancreatic islet cells.QPCR and Western blot assay were employed to detect the overexpression of FTO in MIN6 cells. Glucose-stimulated insulin secretion (GSIS)was performed to detect the insulin secretion of MIN6 cells.Mouse gene microarray was used to detect the differential gene expression profile of the islet cells modulated by FTO overexpression.MIN6 cells stably expressing FTO was achieved by lentivirus delivery.FTO overexpression significantly inhibits the insulin secretion.The microar-ray shows that there are totally 922 differential expression genes.FTO overexpression changes the gene expression profile of MIN6 cells.The differentially expressed genes may regulate the isletβcells functions via important signal pathways.