口腔材料器械杂志
口腔材料器械雜誌
구강재료기계잡지
CHINESE JOURNAL OF DENTAL MATERIALS AND DEVICES
2014年
4期
198-203
,共6页
汪艳%吴婷婷%李静%施琼玲%黄慧
汪豔%吳婷婷%李靜%施瓊玲%黃慧
왕염%오정정%리정%시경령%황혜
微小核糖核酸%成骨分化%MC3T3-E1细胞%釉基质蛋白
微小覈糖覈痠%成骨分化%MC3T3-E1細胞%釉基質蛋白
미소핵당핵산%성골분화%MC3T3-E1세포%유기질단백
miRNA%Osteogenic differentiation%MC3T3-E1Cells%EMD
目的 探讨微小核糖核酸(micro ribonucleicacid,miRNA)是否参与到釉基质蛋白(EnamelMatrix Derivative,EMD)诱导的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞成骨分化的过程,并对发生显著变化的miRNA进行分析.方法 将MC3T3-E1用含EMD(刺激组)/不含EMD(对照组)的培养液培养0天、7天和14天,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析成骨分化标记物ALP、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨钙素(osteocalcin,OC)的信使RNA(mRNA)水平的表达变化.利用基因芯片技术分析miRNA的相对表达.结果 0天、7天、14天的ALP染色结果显示随着培养时间的增加,两组ALP活性均逐渐增强,EMD刺激组ALP活性增强较对照组更为明显.RT-PCR结果表明,与对照组相比,ALP、BSP、OC的mRNA表达量均显著增加,ALP与OC均于14天时表达量达到峰值,BSP则于7天时处于峰值表达,EMD刺激组MC3T3-E1成骨活性更强;各期11个miRNA表达上调,28个miRNA表达下调,其中miR-335-5p,miR-503已被证实可参与促进骨形成,而miR-30家族(miR-30a,-30b,-30c和-30d)则被证实参与抑制成骨.结论 miRNA参与EMD诱导的MC3T3-E1细胞的成骨分化过程,这一发现可以为了解EMD促进成骨分化的机理及临床应用提供指导.
目的 探討微小覈糖覈痠(micro ribonucleicacid,miRNA)是否參與到釉基質蛋白(EnamelMatrix Derivative,EMD)誘導的小鼠前成骨細胞繫MC3T3-E1細胞成骨分化的過程,併對髮生顯著變化的miRNA進行分析.方法 將MC3T3-E1用含EMD(刺激組)/不含EMD(對照組)的培養液培養0天、7天和14天,檢測堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,實時聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術分析成骨分化標記物ALP、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)和骨鈣素(osteocalcin,OC)的信使RNA(mRNA)水平的錶達變化.利用基因芯片技術分析miRNA的相對錶達.結果 0天、7天、14天的ALP染色結果顯示隨著培養時間的增加,兩組ALP活性均逐漸增彊,EMD刺激組ALP活性增彊較對照組更為明顯.RT-PCR結果錶明,與對照組相比,ALP、BSP、OC的mRNA錶達量均顯著增加,ALP與OC均于14天時錶達量達到峰值,BSP則于7天時處于峰值錶達,EMD刺激組MC3T3-E1成骨活性更彊;各期11箇miRNA錶達上調,28箇miRNA錶達下調,其中miR-335-5p,miR-503已被證實可參與促進骨形成,而miR-30傢族(miR-30a,-30b,-30c和-30d)則被證實參與抑製成骨.結論 miRNA參與EMD誘導的MC3T3-E1細胞的成骨分化過程,這一髮現可以為瞭解EMD促進成骨分化的機理及臨床應用提供指導.
목적 탐토미소핵당핵산(micro ribonucleicacid,miRNA)시부삼여도유기질단백(EnamelMatrix Derivative,EMD)유도적소서전성골세포계MC3T3-E1세포성골분화적과정,병대발생현저변화적miRNA진행분석.방법 장MC3T3-E1용함EMD(자격조)/불함EMD(대조조)적배양액배양0천、7천화14천,검측감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)활성,실시취합매련식반응(RT-PCR)기술분석성골분화표기물ALP、골연단백(bone sialoprotein,BSP)화골개소(osteocalcin,OC)적신사RNA(mRNA)수평적표체변화.이용기인심편기술분석miRNA적상대표체.결과 0천、7천、14천적ALP염색결과현시수착배양시간적증가,량조ALP활성균축점증강,EMD자격조ALP활성증강교대조조경위명현.RT-PCR결과표명,여대조조상비,ALP、BSP、OC적mRNA표체량균현저증가,ALP여OC균우14천시표체량체도봉치,BSP칙우7천시처우봉치표체,EMD자격조MC3T3-E1성골활성경강;각기11개miRNA표체상조,28개miRNA표체하조,기중miR-335-5p,miR-503이피증실가삼여촉진골형성,이miR-30가족(miR-30a,-30b,-30c화-30d)칙피증실삼여억제성골.결론 miRNA삼여EMD유도적MC3T3-E1세포적성골분화과정,저일발현가이위료해EMD촉진성골분화적궤리급림상응용제공지도.
