武汉体育学院学报
武漢體育學院學報
무한체육학원학보
JOURNAL OF WUHAN INSTITUTE OF PHYSICAL EDUCATION
2014年
11期
61-66
,共6页
杨翼%李章华%贺磊磊%姚宇琴%柳华%王凌骁
楊翼%李章華%賀磊磊%姚宇琴%柳華%王凌驍
양익%리장화%하뢰뢰%요우금%류화%왕릉효
3-甲基腺嘌呤%无糖无血清培养%心肌细胞%自噬%凋亡
3-甲基腺嘌呤%無糖無血清培養%心肌細胞%自噬%凋亡
3-갑기선표령%무당무혈청배양%심기세포%자서%조망
目的:观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对“饥饿状态”心肌细胞自噬和凋亡的影响,以探讨调控“饥饿状态”下心肌细胞自噬与凋亡的方法.方法:新生1-3日龄Wistar雄性大鼠乳鼠30只,随机平均分为三组:正常对照组、无糖无血清组和3-MA组,每组10只.取出心脏分离心肌细胞,培养5d进行相应处理后,通过流式细胞仪和透射电镜观察心肌细胞自噬和凋亡,免疫荧光和Western-blot检测心肌细胞Beclin1蛋白的表达.结果:①正常培养的心肌细胞较少发生自噬和凋亡,“饥饿状态”下心肌细胞凋亡率无明显上升,但自噬数量明显增加;②与正常培养的心肌细胞相比,“饥饿状态”下心肌细胞Beclin1表达表现为显著性的上升(P＜0.01);而3-MA预处理后心肌细胞Beclin1表达呈现显著性的下降(P＜0.01).结论:“饥饿状态”可促使心肌细胞自噬发生而对凋亡无明显影响;自噬抑制剂3-MA则明显抑制“饥饿状态”下心肌细胞发生自噬,从而间接引起心肌细胞凋亡的上升,造成心肌细胞死亡.
目的:觀察自噬抑製劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)對“饑餓狀態”心肌細胞自噬和凋亡的影響,以探討調控“饑餓狀態”下心肌細胞自噬與凋亡的方法.方法:新生1-3日齡Wistar雄性大鼠乳鼠30隻,隨機平均分為三組:正常對照組、無糖無血清組和3-MA組,每組10隻.取齣心髒分離心肌細胞,培養5d進行相應處理後,通過流式細胞儀和透射電鏡觀察心肌細胞自噬和凋亡,免疫熒光和Western-blot檢測心肌細胞Beclin1蛋白的錶達.結果:①正常培養的心肌細胞較少髮生自噬和凋亡,“饑餓狀態”下心肌細胞凋亡率無明顯上升,但自噬數量明顯增加;②與正常培養的心肌細胞相比,“饑餓狀態”下心肌細胞Beclin1錶達錶現為顯著性的上升(P＜0.01);而3-MA預處理後心肌細胞Beclin1錶達呈現顯著性的下降(P＜0.01).結論:“饑餓狀態”可促使心肌細胞自噬髮生而對凋亡無明顯影響;自噬抑製劑3-MA則明顯抑製“饑餓狀態”下心肌細胞髮生自噬,從而間接引起心肌細胞凋亡的上升,造成心肌細胞死亡.
목적:관찰자서억제제3-갑기선표령(3-MA)대“기아상태”심기세포자서화조망적영향,이탐토조공“기아상태”하심기세포자서여조망적방법.방법:신생1-3일령Wistar웅성대서유서30지,수궤평균분위삼조:정상대조조、무당무혈청조화3-MA조,매조10지.취출심장분리심기세포,배양5d진행상응처리후,통과류식세포의화투사전경관찰심기세포자서화조망,면역형광화Western-blot검측심기세포Beclin1단백적표체.결과:①정상배양적심기세포교소발생자서화조망,“기아상태”하심기세포조망솔무명현상승,단자서수량명현증가;②여정상배양적심기세포상비,“기아상태”하심기세포Beclin1표체표현위현저성적상승(P＜0.01);이3-MA예처리후심기세포Beclin1표체정현현저성적하강(P＜0.01).결론:“기아상태”가촉사심기세포자서발생이대조망무명현영향;자서억제제3-MA칙명현억제“기아상태”하심기세포발생자서,종이간접인기심기세포조망적상승,조성심기세포사망.
