中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
11期
2033-2037
,共5页
郑媛媛%杨文欣%周晗%胡巢凤
鄭媛媛%楊文訢%週晗%鬍巢鳳
정원원%양문흔%주함%호소봉
L02细胞%过氧化氢%NOD8%半胱氨酸蛋白酶-3
L02細胞%過氧化氫%NOD8%半胱氨痠蛋白酶-3
L02세포%과양화경%NOD8%반광안산단백매-3
L02 cells%H2O2%NOD8%Caspase-3
目的:探讨NOD8对H2O2诱导的人肝细胞L02凋亡的影响.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重组质粒经JetPRIME介导转染L02细胞;用H2O2诱导细胞凋亡.实验分为pEGFP-C2组、pEGFP-C2+ H2O2组和pEGFP-NOD8+ H2O2组.采用MTT法检测细胞活性,Western blotting检测细胞NOD8的蛋白表达,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法检测细胞caspase-3活性.结果:通过MTT检测不同浓度(0.2～2 mmol/L)H2O2刺激6h后的细胞活性,确定1mmol/L H2O2为诱导细胞凋亡的剂量.Western blotting检测结果显示,转染pEGFP-NOD8质粒的细胞NOD8蛋白表达明显增加.Hoechst 33342染色法观察发现,pEGFP-C2+ H2 O2组有较多细胞出现强蓝色荧光细胞核,细胞凋亡较多,而pEGFP-NOD8+ H2O2组细胞凋亡明显减少.流式细胞术分析显示,pEGFP-C2+ H2O2组的细胞凋亡率明显升高,pEGFP-NOD8+ H2O2组的细胞凋亡率则显著下降.pEGFP-C2+ H2O2组细胞的caspase-3活性明显升高,而pEGFP-NOD8+ H2O2组细胞的caspase-3活性显著下降.结论:NOD8可抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡,其作用机制可能与NOD8抑制细胞的caspase-3活性有关.
目的:探討NOD8對H2O2誘導的人肝細胞L02凋亡的影響.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重組質粒經JetPRIME介導轉染L02細胞;用H2O2誘導細胞凋亡.實驗分為pEGFP-C2組、pEGFP-C2+ H2O2組和pEGFP-NOD8+ H2O2組.採用MTT法檢測細胞活性,Western blotting檢測細胞NOD8的蛋白錶達,Hoechst 33342染色檢測細胞凋亡情況,流式細胞術檢測細胞凋亡率,比色法檢測細胞caspase-3活性.結果:通過MTT檢測不同濃度(0.2～2 mmol/L)H2O2刺激6h後的細胞活性,確定1mmol/L H2O2為誘導細胞凋亡的劑量.Western blotting檢測結果顯示,轉染pEGFP-NOD8質粒的細胞NOD8蛋白錶達明顯增加.Hoechst 33342染色法觀察髮現,pEGFP-C2+ H2 O2組有較多細胞齣現彊藍色熒光細胞覈,細胞凋亡較多,而pEGFP-NOD8+ H2O2組細胞凋亡明顯減少.流式細胞術分析顯示,pEGFP-C2+ H2O2組的細胞凋亡率明顯升高,pEGFP-NOD8+ H2O2組的細胞凋亡率則顯著下降.pEGFP-C2+ H2O2組細胞的caspase-3活性明顯升高,而pEGFP-NOD8+ H2O2組細胞的caspase-3活性顯著下降.結論:NOD8可抑製H2O2誘導的L02細胞凋亡,其作用機製可能與NOD8抑製細胞的caspase-3活性有關.
목적:탐토NOD8대H2O2유도적인간세포L02조망적영향.방법:pEGFP-C2급pEGFP-NOD8중조질립경JetPRIME개도전염L02세포;용H2O2유도세포조망.실험분위pEGFP-C2조、pEGFP-C2+ H2O2조화pEGFP-NOD8+ H2O2조.채용MTT법검측세포활성,Western blotting검측세포NOD8적단백표체,Hoechst 33342염색검측세포조망정황,류식세포술검측세포조망솔,비색법검측세포caspase-3활성.결과:통과MTT검측불동농도(0.2～2 mmol/L)H2O2자격6h후적세포활성,학정1mmol/L H2O2위유도세포조망적제량.Western blotting검측결과현시,전염pEGFP-NOD8질립적세포NOD8단백표체명현증가.Hoechst 33342염색법관찰발현,pEGFP-C2+ H2 O2조유교다세포출현강람색형광세포핵,세포조망교다,이pEGFP-NOD8+ H2O2조세포조망명현감소.류식세포술분석현시,pEGFP-C2+ H2O2조적세포조망솔명현승고,pEGFP-NOD8+ H2O2조적세포조망솔칙현저하강.pEGFP-C2+ H2O2조세포적caspase-3활성명현승고,이pEGFP-NOD8+ H2O2조세포적caspase-3활성현저하강.결론:NOD8가억제H2O2유도적L02세포조망,기작용궤제가능여NOD8억제세포적caspase-3활성유관.
