CAJ | 학술논문

目的:研究黄酮类化合物F01WB1695B对脂肪变性人胚肝细胞L-02中脂质合成的抑制作用及其分子作用机制.方法:通过体外油酸诱导L-02细胞发生脂肪化,建立肝细胞脂肪变性细胞模型,再利用不同剂量的F01WB1695B干预脂肪化L-02细胞24h后,通过油红O染色观察细胞内脂滴量变化,并通过定量检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)的含量,确定F01WB1695B干预肝细胞脂肪变性的效果.利用报告基因细胞检测方法评价F01WB1695B对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)的转录激动作用.利用实时荧光定量PCR方法检测F01WB1695B对脂代谢相关基因硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)、酰基辅酶A氧化酶1(acyl-CoA oxidase 1,ACOX1)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)mRNA水平的影响.结果:与正常组相比,20 mg/L油酸诱导L-02细胞48h后,油红O染色观察细胞内脂滴量明显增加,模型组TG和TC的含量显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01);F01WB1695B在20 mg/L浓度及以下时对脂肪化肝细胞无细胞毒作用,F01WB1695B干预脂肪化L-02细胞24h后,与模型组相比,在0.2～2 mg/L浓度下细胞内脂滴量明显减少,胞内TG和TC值显著降低(P＜0.05).瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果显示,F01WB1695B对核受体PPAR有较高的转录激活效应,其EC50值为0.5～2.1 mg/L.实时荧光定量PCR结果显示,F01WB1695B可下调脂肪酸合成相关基因SCD1和FASN mRNA的表达,上调脂肪分解代谢相关基因ACOX1 mRNA的表达.结论:黄酮类化合物F01WB1695B可明显降低脂肪变性肝细胞中TG及TC含量,抑制肝细胞脂肪变性,而该作用机制可能是通过激活PPAR通路,下调SCD1和FASNmRNA的表达,上调ACOX1 mRNA的表达,进而降低细胞内甘油三脂水平.
목적:연구황동류화합물F01WB1695B대지방변성인배간세포L-02중지질합성적억제작용급기분자작용궤제.방법:통과체외유산유도L-02세포발생지방화,건립간세포지방변성세포모형,재이용불동제량적F01WB1695B간예지방화L-02세포24h후,통과유홍O염색관찰세포내지적량변화,병통과정량검측세포내감유삼지(triglyceride,TG)화총담고순(total cholesterol,TC)적함량,학정F01WB1695B간예간세포지방변성적효과.이용보고기인세포검측방법평개F01WB1695B대대사성핵수체과양화물매체증식물격활수체(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)적전록격동작용.이용실시형광정량PCR방법검측F01WB1695B대지대사상관기인경지선보매A거포화매1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)、선기보매A양화매1(acyl-CoA oxidase 1,ACOX1)화지방산합성매(fatty acid synthase,FASN)mRNA수평적영향.결과:여정상조상비,20 mg/L유산유도L-02세포48h후,유홍O염색관찰세포내지적량명현증가,모형조TG화TC적함량현저승고,차이유통계학의의(P＜0.01);F01WB1695B재20 mg/L농도급이하시대지방화간세포무세포독작용,F01WB1695B간예지방화L-02세포24h후,여모형조상비,재0.2～2 mg/L농도하세포내지적량명현감소,포내TG화TC치현저강저(P＜0.05).순시전염적세포보고기인적전록격활효응연구결과현시,F01WB1695B대핵수체PPAR유교고적전록격활효응,기EC50치위0.5～2.1 mg/L.실시형광정량PCR결과현시,F01WB1695B가하조지방산합성상관기인SCD1화FASN mRNA적표체,상조지방분해대사상관기인ACOX1 mRNA적표체.결론:황동류화합물F01WB1695B가명현강저지방변성간세포중TG급TC함량,억제간세포지방변성,이해작용궤제가능시통과격활PPAR통로,하조SCD1화FASNmRNA적표체,상조ACOX1 mRNA적표체,진이강저세포내감유삼지수평.