广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
22期
3471-3473
,共3页
刘波%黄涛%沈勇%蒋宏国%杨智勇%邓兴力
劉波%黃濤%瀋勇%蔣宏國%楊智勇%鄧興力
류파%황도%침용%장굉국%양지용%산흥력
核相关受体因子1%真核表达%转染
覈相關受體因子1%真覈錶達%轉染
핵상관수체인자1%진핵표체%전염
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目的 构建核相关受体因子1(Nurr1)基因真核表达载体,观察其在HeLa细胞内的表达.方法 利用RT-PCR技术从大鼠脑组织总RNA中扩增Nurr1 cDNA,并将其克隆到真核表达载体pCDNA3.1中,经酶切鉴定和序列分析后,以Lipofectamine 2000介导转染HeLa细胞,应用荧光定量PCR检测鉴定Nurr1在细胞内的表达.结果 RT-PCR的产物经重组质粒pCDNA3.1酶切,DNA测序证实1 797 bp片段的碱基序列与预期目的基因基本一致.将其转染HeLa细胞后,荧光定量PCR结果表明Nurr1在真核细胞中正确表达.结论 成功构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-Nurr1,为后续的研究奠定基础.
目的 構建覈相關受體因子1(Nurr1)基因真覈錶達載體,觀察其在HeLa細胞內的錶達.方法 利用RT-PCR技術從大鼠腦組織總RNA中擴增Nurr1 cDNA,併將其剋隆到真覈錶達載體pCDNA3.1中,經酶切鑒定和序列分析後,以Lipofectamine 2000介導轉染HeLa細胞,應用熒光定量PCR檢測鑒定Nurr1在細胞內的錶達.結果 RT-PCR的產物經重組質粒pCDNA3.1酶切,DNA測序證實1 797 bp片段的堿基序列與預期目的基因基本一緻.將其轉染HeLa細胞後,熒光定量PCR結果錶明Nurr1在真覈細胞中正確錶達.結論 成功構建瞭重組真覈錶達質粒pCDNA3.1-Nurr1,為後續的研究奠定基礎.
목적 구건핵상관수체인자1(Nurr1)기인진핵표체재체,관찰기재HeLa세포내적표체.방법 이용RT-PCR기술종대서뇌조직총RNA중확증Nurr1 cDNA,병장기극륭도진핵표체재체pCDNA3.1중,경매절감정화서렬분석후,이Lipofectamine 2000개도전염HeLa세포,응용형광정량PCR검측감정Nurr1재세포내적표체.결과 RT-PCR적산물경중조질립pCDNA3.1매절,DNA측서증실1 797 bp편단적감기서렬여예기목적기인기본일치.장기전염HeLa세포후,형광정량PCR결과표명Nurr1재진핵세포중정학표체.결론 성공구건료중조진핵표체질립pCDNA3.1-Nurr1,위후속적연구전정기출.
