中华眼科医学杂志（电子版）
中華眼科醫學雜誌（電子版）
중화안과의학잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGIC MEDICINE(ELECTRONIC EDITION)
2014年
6期
334-337
,共4页
角膜%新生血管%骨桥蛋白%动物模型
角膜%新生血管%骨橋蛋白%動物模型
각막%신생혈관%골교단백%동물모형
Corneal%Neovascularization%Osteopontin%Animal model
目的：建立兔眼角膜碱烧伤新生血管动物模型，并探讨房水中骨桥蛋白（ OPN）与角膜新生血管（ CNV）的相关性，为研究CNV的形成机制提供实验依据。方法选取内蒙古医科大学动物实验中心2014年4月64只12月龄的新西兰大耳兔进行实验，体重2．0～2．5 kg，雌雄不限，裂隙灯显微镜检查实验兔无眼疾，常规饲养。采用数字表法将兔随机分成A、B、C、D、E、F、G、H组，每组8只兔。其中A组为对照组，其余7组为实验组。碱烧伤制作CNV动物模型，不同时间点测量各组CNV长度并抽取兔双眼房水，计算CNV面积并检测房水中OPN的浓度。 CNV面积和OPN浓度以均数±标准差（ x珋±s）的形式表示，并采用单因素方差分析的方法进行组间比较，当比较结果有统计学意义时，进一步采用SNK法进行组间两两比较。结果 A组兔角膜透明无血管，角膜缘血管网呈环形并不侵入角膜。角膜碱烧伤后3d对应的B组炎症反应较重，结膜充血水肿，角膜水肿，角膜碱烧伤斑明显，CNV面积为（23．88±0．89）mm2；5 d后对应的C组CNV面积为（27．59±0．73）mm2；7 d后对应的D组角巩膜缘处可见CNV芽呈毛刷状长入角膜，角巩膜缘血管明显扩张，CNV面积为（34．46±0．72）mm2；11 d后对应的E组CNV生长旺盛，均匀致密，部分侵入烧伤斑，CNV 面积为（38．54±0．56）mm2；14 d对应的F组CNV致密呈网状，血管粗大多数长至角膜中央区，CNV面积为（41．95±0．34）mm2；21 d对应的G组新生血管较多较粗，但数量有所减少，CNV面积（41．93±0．33）mm2；28 d对应的H组CNV变得稀疏，分支也减少，CNV面积为（39．81±0．89）mm2，各组间CNV面积比较，差异有统计学意义（F＝72．41，P ＜0．05）。角膜碱烧伤后A组对应时间点房水OPN浓度平均为（0．47±0．10）μg／L，角膜碱烧伤3 d后对应的B组房水OPN浓度为（1．75±0．07）μg／L，变化较为明显，与对照组比较，差异有统计学意义（P ＜0．05）；7 d后所对应的C组OPN浓度为（5．51±1．18）μg／L，此时OPN浓度变化的幅度开始增大，与对照组浓度相比，差异有统计学意义（ P ＜0．05）；14 d后对应的F组房水中OPN浓度为（20．79±1．17）μg／L，房水中OPN的浓度已经达到最大值，与对照组相比，差异有统计学意义（P ＜0．05）；21 d后对应的G组房水中OPN的浓度为（13．30±0．77）μg／L，与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0．05）。28 d后对应的H组房水中OPN的浓度为（7．69±0．26）μg／L，与对照组相比，差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论成功建立了兔眼角膜碱烧伤新生血管动物模型；并且发现该动物模型房水中OPN的变化趋势与CNV面积的变化趋势基本一致，说明OPN在参与CNV形成过程中起重要作用。
目的：建立兔眼角膜堿燒傷新生血管動物模型，併探討房水中骨橋蛋白（ OPN）與角膜新生血管（ CNV）的相關性，為研究CNV的形成機製提供實驗依據。方法選取內矇古醫科大學動物實驗中心2014年4月64隻12月齡的新西蘭大耳兔進行實驗，體重2．0～2．5 kg，雌雄不限，裂隙燈顯微鏡檢查實驗兔無眼疾，常規飼養。採用數字錶法將兔隨機分成A、B、C、D、E、F、G、H組，每組8隻兔。其中A組為對照組，其餘7組為實驗組。堿燒傷製作CNV動物模型，不同時間點測量各組CNV長度併抽取兔雙眼房水，計算CNV麵積併檢測房水中OPN的濃度。 CNV麵積和OPN濃度以均數±標準差（ x珋±s）的形式錶示，併採用單因素方差分析的方法進行組間比較，噹比較結果有統計學意義時，進一步採用SNK法進行組間兩兩比較。結果 A組兔角膜透明無血管，角膜緣血管網呈環形併不侵入角膜。角膜堿燒傷後3d對應的B組炎癥反應較重，結膜充血水腫，角膜水腫，角膜堿燒傷斑明顯，CNV麵積為（23．88±0．89）mm2；5 d後對應的C組CNV麵積為（27．59±0．73）mm2；7 d後對應的D組角鞏膜緣處可見CNV芽呈毛刷狀長入角膜，角鞏膜緣血管明顯擴張，CNV麵積為（34．46±0．72）mm2；11 d後對應的E組CNV生長旺盛，均勻緻密，部分侵入燒傷斑，CNV 麵積為（38．54±0．56）mm2；14 d對應的F組CNV緻密呈網狀，血管粗大多數長至角膜中央區，CNV麵積為（41．95±0．34）mm2；21 d對應的G組新生血管較多較粗，但數量有所減少，CNV麵積（41．93±0．33）mm2；28 d對應的H組CNV變得稀疏，分支也減少，CNV麵積為（39．81±0．89）mm2，各組間CNV麵積比較，差異有統計學意義（F＝72．41，P ＜0．05）。角膜堿燒傷後A組對應時間點房水OPN濃度平均為（0．47±0．10）μg／L，角膜堿燒傷3 d後對應的B組房水OPN濃度為（1．75±0．07）μg／L，變化較為明顯，與對照組比較，差異有統計學意義（P ＜0．05）；7 d後所對應的C組OPN濃度為（5．51±1．18）μg／L，此時OPN濃度變化的幅度開始增大，與對照組濃度相比，差異有統計學意義（ P ＜0．05）；14 d後對應的F組房水中OPN濃度為（20．79±1．17）μg／L，房水中OPN的濃度已經達到最大值，與對照組相比，差異有統計學意義（P ＜0．05）；21 d後對應的G組房水中OPN的濃度為（13．30±0．77）μg／L，與對照組相比，差異有統計學意義（P＜0．05）。28 d後對應的H組房水中OPN的濃度為（7．69±0．26）μg／L，與對照組相比，差異有統計學意義（ P＜0．05）。結論成功建立瞭兔眼角膜堿燒傷新生血管動物模型；併且髮現該動物模型房水中OPN的變化趨勢與CNV麵積的變化趨勢基本一緻，說明OPN在參與CNV形成過程中起重要作用。
목적：건립토안각막감소상신생혈관동물모형，병탐토방수중골교단백（ OPN）여각막신생혈관（ CNV）적상관성，위연구CNV적형성궤제제공실험의거。방법선취내몽고의과대학동물실험중심2014년4월64지12월령적신서란대이토진행실험，체중2．0～2．5 kg，자웅불한，렬극등현미경검사실험토무안질，상규사양。채용수자표법장토수궤분성A、B、C、D、E、F、G、H조，매조8지토。기중A조위대조조，기여7조위실험조。감소상제작CNV동물모형，불동시간점측량각조CNV장도병추취토쌍안방수，계산CNV면적병검측방수중OPN적농도。 CNV면적화OPN농도이균수±표준차（ x류±s）적형식표시，병채용단인소방차분석적방법진행조간비교，당비교결과유통계학의의시，진일보채용SNK법진행조간량량비교。결과 A조토각막투명무혈관，각막연혈관망정배형병불침입각막。각막감소상후3d대응적B조염증반응교중，결막충혈수종，각막수종，각막감소상반명현，CNV면적위（23．88±0．89）mm2；5 d후대응적C조CNV면적위（27．59±0．73）mm2；7 d후대응적D조각공막연처가견CNV아정모쇄상장입각막，각공막연혈관명현확장，CNV면적위（34．46±0．72）mm2；11 d후대응적E조CNV생장왕성，균균치밀，부분침입소상반，CNV 면적위（38．54±0．56）mm2；14 d대응적F조CNV치밀정망상，혈관조대다수장지각막중앙구，CNV면적위（41．95±0．34）mm2；21 d대응적G조신생혈관교다교조，단수량유소감소，CNV면적（41．93±0．33）mm2；28 d대응적H조CNV변득희소，분지야감소，CNV면적위（39．81±0．89）mm2，각조간CNV면적비교，차이유통계학의의（F＝72．41，P ＜0．05）。각막감소상후A조대응시간점방수OPN농도평균위（0．47±0．10）μg／L，각막감소상3 d후대응적B조방수OPN농도위（1．75±0．07）μg／L，변화교위명현，여대조조비교，차이유통계학의의（P ＜0．05）；7 d후소대응적C조OPN농도위（5．51±1．18）μg／L，차시OPN농도변화적폭도개시증대，여대조조농도상비，차이유통계학의의（ P ＜0．05）；14 d후대응적F조방수중OPN농도위（20．79±1．17）μg／L，방수중OPN적농도이경체도최대치，여대조조상비，차이유통계학의의（P ＜0．05）；21 d후대응적G조방수중OPN적농도위（13．30±0．77）μg／L，여대조조상비，차이유통계학의의（P＜0．05）。28 d후대응적H조방수중OPN적농도위（7．69±0．26）μg／L，여대조조상비，차이유통계학의의（ P＜0．05）。결론성공건립료토안각막감소상신생혈관동물모형；병차발현해동물모형방수중OPN적변화추세여CNV면적적변화추세기본일치，설명OPN재삼여CNV형성과정중기중요작용。
Objective To establish the relationship of osteopontin ( OPN ) with corneal neovascularization ( CNV) in a rabbit model of alkali corneal burns.Methods Sixty-four New Zealand big-eared rabbits, weighing 2.0-2.5 kg and aged 12 months,were randomized to 8 groups (i.e.,A,B,C,D,E, F,G and H, n=8 ) .Animals in group A were left untreated and served as controls, while those in the remaining 7 groups were subjected to corneal burns with 2 mol/L sodium hydroxide.At different time points after corneal burns,the length and area of the newly formed small vessels in the injured cornea were assessed and OPN concentrations in the aqueous humor collected from the eye were measured by ELISA.Results In the control group, the cornea was transparent without either new blood vessel formation or invasion of the limbal vascular network in the ring into the corneal area ( CNV=0 mm2 ) .In animals with experimental alkali corneal burns, inflammation aggravated gradually between post-burn day 3 and day 14 and conjunctival hyperemia and edema and corneal edema were significantly more evident as compared with control animals (P<0.05);from day 14 to day 28 conjunctival hyperemia and edema,corneal edema,and corneal alkali burns became stable.Low OPN concentration (0.47±0.10μg/L) was detected in the corneal aqueous humor in control animals.In animals with experimental corneal burns,OPN concentration was gradually increasing from day 3 to day 14 (P <0.05) but was gradually decreasing from day 14 d to day 28 (P <0.05). Conclusion Corneal angiogenesis is closely correlated with OPN concentrations in the aqueous humor of the eye,suggesting an important role for OPN in.corneal neovascularization after burn injury.
