石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2014年
5期
536-542
,共7页
马慧%苟亚峰%刘朋涛%高剑峰
馬慧%茍亞峰%劉朋濤%高劍峰
마혜%구아봉%류붕도%고검봉
布鲁氏菌%绿色荧光蛋白%巨噬细胞系%激光共聚焦显微镜%流式细胞仪
佈魯氏菌%綠色熒光蛋白%巨噬細胞繫%激光共聚焦顯微鏡%流式細胞儀
포로씨균%록색형광단백%거서세포계%격광공취초현미경%류식세포의
Brucella%macrophage%greenfluorescent protein%confocal laser scanning microscope%flow cytometry
通过对绿色荧光蛋白(GFP)布鲁氏菌16M(强毒株)和M5(弱毒株)侵染小鼠巨噬细胞及胞内溶酶体、内质网、高尔基体初次结合所用时间进行测定,探讨二者在结合所用时间上是否存在差异;其次比较GFP布鲁氏菌16M和M5与胞内各细胞器结合产生的荧光强度.将GFP布鲁氏菌16M(强毒株)和M5(弱毒株)分不同时间段分别侵染RAW 264.7(细菌和细胞比例为100:1),利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察和检测.结果表明:布鲁氏菌16M和M5侵染初期10 min时进入巨噬细胞,1.5 h时布鲁氏菌到达溶酶体,2.0 h时布鲁氏菌到达内质网和高尔基体.结果提示,布鲁氏菌16M和M5在侵染进入宿主细胞与胞内各细胞器初次结合所用时间相同,但布鲁氏菌16M与各细胞器结合的荧光强度均高于布鲁氏菌M5.以此推断布鲁氏菌16M进入胞内的数量高于布鲁氏菌M5.
通過對綠色熒光蛋白(GFP)佈魯氏菌16M(彊毒株)和M5(弱毒株)侵染小鼠巨噬細胞及胞內溶酶體、內質網、高爾基體初次結閤所用時間進行測定,探討二者在結閤所用時間上是否存在差異;其次比較GFP佈魯氏菌16M和M5與胞內各細胞器結閤產生的熒光彊度.將GFP佈魯氏菌16M(彊毒株)和M5(弱毒株)分不同時間段分彆侵染RAW 264.7(細菌和細胞比例為100:1),利用激光共聚焦顯微鏡和流式細胞儀觀察和檢測.結果錶明:佈魯氏菌16M和M5侵染初期10 min時進入巨噬細胞,1.5 h時佈魯氏菌到達溶酶體,2.0 h時佈魯氏菌到達內質網和高爾基體.結果提示,佈魯氏菌16M和M5在侵染進入宿主細胞與胞內各細胞器初次結閤所用時間相同,但佈魯氏菌16M與各細胞器結閤的熒光彊度均高于佈魯氏菌M5.以此推斷佈魯氏菌16M進入胞內的數量高于佈魯氏菌M5.
통과대록색형광단백(GFP)포로씨균16M(강독주)화M5(약독주)침염소서거서세포급포내용매체、내질망、고이기체초차결합소용시간진행측정,탐토이자재결합소용시간상시부존재차이;기차비교GFP포로씨균16M화M5여포내각세포기결합산생적형광강도.장GFP포로씨균16M(강독주)화M5(약독주)분불동시간단분별침염RAW 264.7(세균화세포비례위100:1),이용격광공취초현미경화류식세포의관찰화검측.결과표명:포로씨균16M화M5침염초기10 min시진입거서세포,1.5 h시포로씨균도체용매체,2.0 h시포로씨균도체내질망화고이기체.결과제시,포로씨균16M화M5재침염진입숙주세포여포내각세포기초차결합소용시간상동,단포로씨균16M여각세포기결합적형광강도균고우포로씨균M5.이차추단포로씨균16M진입포내적수량고우포로씨균M5.
