北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2014年
6期
894-898
,共5页
耿强%陈红%任景怡%宋俊贤%李素芳
耿彊%陳紅%任景怡%宋俊賢%李素芳
경강%진홍%임경이%송준현%리소방
微颗粒%微RNAs%细胞间通讯
微顆粒%微RNAs%細胞間通訊
미과립%미RNAs%세포간통신
Microparticles%micro RNAs%Cell communication
目的:探讨微颗粒(microparticles,MP)作为载体携带microRNAs(miRNAs)在介导细胞间信号传递中的作用.方法:用梯度离心的方法获得人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和293T细胞来源的微颗粒,将微颗粒与人急性单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)共培养,然后应用transwell迁移实验观察THP-1细胞迁移情况;用实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及Western blotting实验的方法,分析微颗粒携带miRNAs影响单核细胞迁移的机制.结果:通过transwell实验发现,HUVEC细胞来源的微颗粒(MPHUVEC)组THP-1细胞迁移数明显多于293T细胞来源的微颗粒(MP293T)组,差异有统计学意义(P<0.05);MPHUVEC组THP-1细胞CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均明显高于MP293T组,差异有统计学意义(P<0.05).HUVEC细胞分别给予lipo2000、lipo2000+ miRNA inhibitor和lipo2000+ miRNA-126 inhibitor不同处理获得的微颗粒为MPcon、MPneg-con、MP-126 inhibitor,与MPneg-con组、MPneg-con组相比,MPmiR-126mbibitor组THP-1细胞迁移数明显减少,差异有统计学意义(P <0.05);MPmiR-126 inhibitor组THP-1细胞CXCR4mRNA及蛋白表达水平显著低于MPcon组、MPneg-con组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:HUVEC细胞来源的微颗粒可以携带miRNA-126促进单核细胞迁移,微颗粒作为载体可以携带miRNAs介导细胞间信号传递.
目的:探討微顆粒(microparticles,MP)作為載體攜帶microRNAs(miRNAs)在介導細胞間信號傳遞中的作用.方法:用梯度離心的方法穫得人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和293T細胞來源的微顆粒,將微顆粒與人急性單覈細胞白血病細胞(THP-1細胞)共培養,然後應用transwell遷移實驗觀察THP-1細胞遷移情況;用實時定量聚閤酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)及Western blotting實驗的方法,分析微顆粒攜帶miRNAs影響單覈細胞遷移的機製.結果:通過transwell實驗髮現,HUVEC細胞來源的微顆粒(MPHUVEC)組THP-1細胞遷移數明顯多于293T細胞來源的微顆粒(MP293T)組,差異有統計學意義(P<0.05);MPHUVEC組THP-1細胞CXCR4 mRNA及蛋白錶達水平均明顯高于MP293T組,差異有統計學意義(P<0.05).HUVEC細胞分彆給予lipo2000、lipo2000+ miRNA inhibitor和lipo2000+ miRNA-126 inhibitor不同處理穫得的微顆粒為MPcon、MPneg-con、MP-126 inhibitor,與MPneg-con組、MPneg-con組相比,MPmiR-126mbibitor組THP-1細胞遷移數明顯減少,差異有統計學意義(P <0.05);MPmiR-126 inhibitor組THP-1細胞CXCR4mRNA及蛋白錶達水平顯著低于MPcon組、MPneg-con組,差異有統計學意義(P<0.05).結論:HUVEC細胞來源的微顆粒可以攜帶miRNA-126促進單覈細胞遷移,微顆粒作為載體可以攜帶miRNAs介導細胞間信號傳遞.
목적:탐토미과립(microparticles,MP)작위재체휴대microRNAs(miRNAs)재개도세포간신호전체중적작용.방법:용제도리심적방법획득인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)화293T세포래원적미과립,장미과립여인급성단핵세포백혈병세포(THP-1세포)공배양,연후응용transwell천이실험관찰THP-1세포천이정황;용실시정량취합매련반응(polymerase chain reaction,PCR)급Western blotting실험적방법,분석미과립휴대miRNAs영향단핵세포천이적궤제.결과:통과transwell실험발현,HUVEC세포래원적미과립(MPHUVEC)조THP-1세포천이수명현다우293T세포래원적미과립(MP293T)조,차이유통계학의의(P<0.05);MPHUVEC조THP-1세포CXCR4 mRNA급단백표체수평균명현고우MP293T조,차이유통계학의의(P<0.05).HUVEC세포분별급여lipo2000、lipo2000+ miRNA inhibitor화lipo2000+ miRNA-126 inhibitor불동처리획득적미과립위MPcon、MPneg-con、MP-126 inhibitor,여MPneg-con조、MPneg-con조상비,MPmiR-126mbibitor조THP-1세포천이수명현감소,차이유통계학의의(P <0.05);MPmiR-126 inhibitor조THP-1세포CXCR4mRNA급단백표체수평현저저우MPcon조、MPneg-con조,차이유통계학의의(P<0.05).결론:HUVEC세포래원적미과립가이휴대miRNA-126촉진단핵세포천이,미과립작위재체가이휴대miRNAs개도세포간신호전체.