北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2014年
6期
889-893
,共5页
殷倩%鲁海燕%杨承志%田爱炬%杨秋香%张幼怡%郑晓晖%李子健%郑小璞
慇倩%魯海燕%楊承誌%田愛炬%楊鞦香%張幼怡%鄭曉暉%李子健%鄭小璞
은천%로해연%양승지%전애거%양추향%장유이%정효휘%리자건%정소박
心脏疾病%纤维化%异丙肾上腺素%NF-κB
心髒疾病%纖維化%異丙腎上腺素%NF-κB
심장질병%섬유화%이병신상선소%NF-κB
Cardiomyopathies%Fibrosis%Isoproterenol%NF-kappaB
目的:应用非选择性β肾上腺素受体激动剂——异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)连续皮下注射7d诱导心脏纤维化模型,并观察此模型中炎症调控核转录因子NF-κB的变化.方法:采用10周龄体重为280 ～320 g的SD大鼠,ISO以0.25 mg/(kg·d)剂量连续背部皮下注射7d诱导心脏纤维化模型.心脏组织切片进行苦味酸-天狼猩红染色观察纤维化,以胶原容量分数进行胶原面积定量统计.应用real-time PCR法检测心脏组织中Ⅰ型/Ⅲ型胶原及炎症因子IL-6的mRNA表达.组织切片进行HE染色观察心脏病理变化.免疫组织化学方法检测心脏组织中NF-κB在细胞内的定位,Western blot法检测心脏组织中磷酸化的NF-κB水平.结果:ISO诱导的心脏纤维化模型中天狼猩红染色面积明显大于对照(control,CON)组,且ISO组的胶原容积分数显著高于CON组(12.01±1.64vs.0.95±0.06,P＜0.001);ISO组Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达显著高于CON组(Ⅰ型胶原:10.51±0.47vs.0.98±0.02,P＜0.001;Ⅲ型胶原:9.58±1.33 vs.1.02±0.02,P＜0.001).ISO组心脏组织中可见细胞核增多、聚集,提示可能炎症细胞浸润,且炎症因子IL-6的mRNA表达水平明显增加(1.64±0.18 vs.1.04±0.07,P ＜0.01).CON组NF-κB主要定位于心肌细胞胞浆中,心肌细胞核中未见NF-κB的定位;ISO组出现明显NF-κB核转位活化,心肌细胞胞浆中的NF-κB较CON组减少,心肌细胞核及间质细胞核均可见明显的NF-κB定位,同时,ISO组心脏组织磷酸化NF-κB的水平明显高于CON组(10.83±2.05vs.1.05±0.27,P＜0.001).结论:连续7d皮下注射ISO可成功诱导心脏纤维化模型,且此模型心脏组织中活化的核转录因子NF-κB增加.
目的:應用非選擇性β腎上腺素受體激動劑——異丙基腎上腺素(isoproterenol,ISO)連續皮下註射7d誘導心髒纖維化模型,併觀察此模型中炎癥調控覈轉錄因子NF-κB的變化.方法:採用10週齡體重為280 ～320 g的SD大鼠,ISO以0.25 mg/(kg·d)劑量連續揹部皮下註射7d誘導心髒纖維化模型.心髒組織切片進行苦味痠-天狼猩紅染色觀察纖維化,以膠原容量分數進行膠原麵積定量統計.應用real-time PCR法檢測心髒組織中Ⅰ型/Ⅲ型膠原及炎癥因子IL-6的mRNA錶達.組織切片進行HE染色觀察心髒病理變化.免疫組織化學方法檢測心髒組織中NF-κB在細胞內的定位,Western blot法檢測心髒組織中燐痠化的NF-κB水平.結果:ISO誘導的心髒纖維化模型中天狼猩紅染色麵積明顯大于對照(control,CON)組,且ISO組的膠原容積分數顯著高于CON組(12.01±1.64vs.0.95±0.06,P＜0.001);ISO組Ⅰ、Ⅲ型膠原的mRNA錶達顯著高于CON組(Ⅰ型膠原:10.51±0.47vs.0.98±0.02,P＜0.001;Ⅲ型膠原:9.58±1.33 vs.1.02±0.02,P＜0.001).ISO組心髒組織中可見細胞覈增多、聚集,提示可能炎癥細胞浸潤,且炎癥因子IL-6的mRNA錶達水平明顯增加(1.64±0.18 vs.1.04±0.07,P ＜0.01).CON組NF-κB主要定位于心肌細胞胞漿中,心肌細胞覈中未見NF-κB的定位;ISO組齣現明顯NF-κB覈轉位活化,心肌細胞胞漿中的NF-κB較CON組減少,心肌細胞覈及間質細胞覈均可見明顯的NF-κB定位,同時,ISO組心髒組織燐痠化NF-κB的水平明顯高于CON組(10.83±2.05vs.1.05±0.27,P＜0.001).結論:連續7d皮下註射ISO可成功誘導心髒纖維化模型,且此模型心髒組織中活化的覈轉錄因子NF-κB增加.
목적:응용비선택성β신상선소수체격동제——이병기신상선소(isoproterenol,ISO)련속피하주사7d유도심장섬유화모형,병관찰차모형중염증조공핵전록인자NF-κB적변화.방법:채용10주령체중위280 ～320 g적SD대서,ISO이0.25 mg/(kg·d)제량련속배부피하주사7d유도심장섬유화모형.심장조직절편진행고미산-천랑성홍염색관찰섬유화,이효원용량분수진행효원면적정량통계.응용real-time PCR법검측심장조직중Ⅰ형/Ⅲ형효원급염증인자IL-6적mRNA표체.조직절편진행HE염색관찰심장병리변화.면역조직화학방법검측심장조직중NF-κB재세포내적정위,Western blot법검측심장조직중린산화적NF-κB수평.결과:ISO유도적심장섬유화모형중천랑성홍염색면적명현대우대조(control,CON)조,차ISO조적효원용적분수현저고우CON조(12.01±1.64vs.0.95±0.06,P＜0.001);ISO조Ⅰ、Ⅲ형효원적mRNA표체현저고우CON조(Ⅰ형효원:10.51±0.47vs.0.98±0.02,P＜0.001;Ⅲ형효원:9.58±1.33 vs.1.02±0.02,P＜0.001).ISO조심장조직중가견세포핵증다、취집,제시가능염증세포침윤,차염증인자IL-6적mRNA표체수평명현증가(1.64±0.18 vs.1.04±0.07,P ＜0.01).CON조NF-κB주요정위우심기세포포장중,심기세포핵중미견NF-κB적정위;ISO조출현명현NF-κB핵전위활화,심기세포포장중적NF-κB교CON조감소,심기세포핵급간질세포핵균가견명현적NF-κB정위,동시,ISO조심장조직린산화NF-κB적수평명현고우CON조(10.83±2.05vs.1.05±0.27,P＜0.001).결론:련속7d피하주사ISO가성공유도심장섬유화모형,차차모형심장조직중활화적핵전록인자NF-κB증가.
