北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2014年
6期
883-888
,共6页
徐璐%王超%沈文文%祁荣
徐璐%王超%瀋文文%祁榮
서로%왕초%침문문%기영
辛伐他汀%间充质干细胞%脂质体%骨形态发生蛋白质类%碱性磷酸酶
辛伐他汀%間充質榦細胞%脂質體%骨形態髮生蛋白質類%堿性燐痠酶
신벌타정%간충질간세포%지질체%골형태발생단백질류%감성린산매
Simvastatin%Mesenchymal stromal cells%Liposomes%Bone morphogenetic proteins%Alkaline phosphatase
目的:通过对骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达进行测定,研究纳米脂质体剂型对辛伐他汀(simvastatin,SMV)在骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)形成骨过程中的促进作用.方法:采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代BMSC.以SMV原料药处理组作为对照组,分别设SMV药物浓度1μmol/L和2μmol/L为SMV低剂量组(SMV low dosage group,S1)和SMV高剂量组(SMV high dosage group,S2);将辛伐他汀纳米脂质体(simvastatin nano-liposomes,SMV-liposome)处理组作为实验组,根据SMV药物包载浓度1μmol/L和2μmol/L分别设为SMV-liposome低剂量组(SMV-liposome low dosage group,SL1)和SMV-liposome高剂量组(SMV-liposome high dosage group,SL2);此外,实验中所有涉及到不做任何处理的组,都作为空白组(blank).将SMV和SMV-liposome分别与BMSC共孵育48 h后,用碱性磷酸酶比色法测定其ALP比活性,用碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT alkaline phosphatase color development kit,BCIP/NBT Kit)检测其ALP蛋白表达量,用Western Blot检测其BMP-2蛋白的表达量.结果:细胞毒性实验结果显示,对照组与实验组在与BMSC共孵育48 h后,各组细胞生存率均高于84％,且组间差异无统计学差意义(P＞0.05).在给药浓度相同时,实验组ALP比活性显著高于对照组,其中S1组和SL1组ALP比活性分别为0.27±1.11和0.21±2.15(P ＜0.001),S2组和SL2组ALP比活性分别为0.63±1.64和0.72 ±2.88(P ＜0.05).ALP BCIP/NBT染色结果表明,与对照组相比,实验组ALP染色更深,且组内呈现剂量依赖性.实验组BMP-2蛋白表达量显著高于对照组.同时,ALP比活性、ALP BCIP/NBT染色及BMP-2蛋白表达结果表明,对照组和实验组内均呈现剂量依赖性,即高剂量组结果优于低剂量组.结论:纳米脂质体剂型能显著提高SMV促进BMSC的成骨分化作用.
目的:通過對骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和堿性燐痠酶(alkaline phosphatase,ALP)的錶達進行測定,研究納米脂質體劑型對辛伐他汀(simvastatin,SMV)在骨髓間充質榦細胞(bone marrow stromal cells,BMSC)形成骨過程中的促進作用.方法:採用全骨髓貼壁培養法體外培養小鼠原代BMSC.以SMV原料藥處理組作為對照組,分彆設SMV藥物濃度1μmol/L和2μmol/L為SMV低劑量組(SMV low dosage group,S1)和SMV高劑量組(SMV high dosage group,S2);將辛伐他汀納米脂質體(simvastatin nano-liposomes,SMV-liposome)處理組作為實驗組,根據SMV藥物包載濃度1μmol/L和2μmol/L分彆設為SMV-liposome低劑量組(SMV-liposome low dosage group,SL1)和SMV-liposome高劑量組(SMV-liposome high dosage group,SL2);此外,實驗中所有涉及到不做任何處理的組,都作為空白組(blank).將SMV和SMV-liposome分彆與BMSC共孵育48 h後,用堿性燐痠酶比色法測定其ALP比活性,用堿性燐痠酯酶顯色試劑盒(BCIP/NBT alkaline phosphatase color development kit,BCIP/NBT Kit)檢測其ALP蛋白錶達量,用Western Blot檢測其BMP-2蛋白的錶達量.結果:細胞毒性實驗結果顯示,對照組與實驗組在與BMSC共孵育48 h後,各組細胞生存率均高于84％,且組間差異無統計學差意義(P＞0.05).在給藥濃度相同時,實驗組ALP比活性顯著高于對照組,其中S1組和SL1組ALP比活性分彆為0.27±1.11和0.21±2.15(P ＜0.001),S2組和SL2組ALP比活性分彆為0.63±1.64和0.72 ±2.88(P ＜0.05).ALP BCIP/NBT染色結果錶明,與對照組相比,實驗組ALP染色更深,且組內呈現劑量依賴性.實驗組BMP-2蛋白錶達量顯著高于對照組.同時,ALP比活性、ALP BCIP/NBT染色及BMP-2蛋白錶達結果錶明,對照組和實驗組內均呈現劑量依賴性,即高劑量組結果優于低劑量組.結論:納米脂質體劑型能顯著提高SMV促進BMSC的成骨分化作用.
목적:통과대골형성단백-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)화감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)적표체진행측정,연구납미지질체제형대신벌타정(simvastatin,SMV)재골수간충질간세포(bone marrow stromal cells,BMSC)형성골과정중적촉진작용.방법:채용전골수첩벽배양법체외배양소서원대BMSC.이SMV원료약처리조작위대조조,분별설SMV약물농도1μmol/L화2μmol/L위SMV저제량조(SMV low dosage group,S1)화SMV고제량조(SMV high dosage group,S2);장신벌타정납미지질체(simvastatin nano-liposomes,SMV-liposome)처리조작위실험조,근거SMV약물포재농도1μmol/L화2μmol/L분별설위SMV-liposome저제량조(SMV-liposome low dosage group,SL1)화SMV-liposome고제량조(SMV-liposome high dosage group,SL2);차외,실험중소유섭급도불주임하처리적조,도작위공백조(blank).장SMV화SMV-liposome분별여BMSC공부육48 h후,용감성린산매비색법측정기ALP비활성,용감성린산지매현색시제합(BCIP/NBT alkaline phosphatase color development kit,BCIP/NBT Kit)검측기ALP단백표체량,용Western Blot검측기BMP-2단백적표체량.결과:세포독성실험결과현시,대조조여실험조재여BMSC공부육48 h후,각조세포생존솔균고우84％,차조간차이무통계학차의의(P＞0.05).재급약농도상동시,실험조ALP비활성현저고우대조조,기중S1조화SL1조ALP비활성분별위0.27±1.11화0.21±2.15(P ＜0.001),S2조화SL2조ALP비활성분별위0.63±1.64화0.72 ±2.88(P ＜0.05).ALP BCIP/NBT염색결과표명,여대조조상비,실험조ALP염색경심,차조내정현제량의뢰성.실험조BMP-2단백표체량현저고우대조조.동시,ALP비활성、ALP BCIP/NBT염색급BMP-2단백표체결과표명,대조조화실험조내균정현제량의뢰성,즉고제량조결과우우저제량조.결론:납미지질체제형능현저제고SMV촉진BMSC적성골분화작용.
