中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2015年
2期
361-363
,共3页
贺春语%胡晓娜%王雯%刘劲松%刘如%王启鸣
賀春語%鬍曉娜%王雯%劉勁鬆%劉如%王啟鳴
하춘어%호효나%왕문%류경송%류여%왕계명
食管肿瘤%细胞增殖%血管内皮抑素%乏氧诱导因子1-α%血管内皮生长因子
食管腫瘤%細胞增殖%血管內皮抑素%乏氧誘導因子1-α%血管內皮生長因子
식관종류%세포증식%혈관내피억소%핍양유도인자1-α%혈관내피생장인자
Esophageal carcinoma%Cell proliferation%Endostar%Hypoxia inducible factor-1α%Vascular endothelial growth factor
目的 观察重组血管内皮抑素(Endostar)对人食管癌细胞株EC9706细胞体外生长及对乏氧诱导因子-1 α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/L)Endostar对EC9706细胞增殖24、48、72 h的抑制率;免疫细胞化学和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验分为不同浓度(25、50、100 μg/L)实验组和对照组,分别作用48 h后,检测Endostar作用后HIF-1α、VEGF蛋白和基因表达量的变化.结果 Endostar抑制EC9706细胞增殖,呈时间和浓度依赖性,200 μg/L Endostar作用72 h,其抑制率为46.78％;免疫细胞化学检测不同浓度(25.0、50.0、100.0 μg/L)实验组HIF-1α的平均吸光度值分别为0.115 ±0.009、0.089士0.011、0.056±0.009,VGFR的平均吸光度值分别为0.137±0.007、0.102±0.008、0.063±0.007,两者实验各组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);RT-PCR检测不同浓度(25.0、50.0、100.0 μg/L)实验组HIF-1αmRNA的相对表达量分别为0.469±0.530、0.233±0.280、0.171±0.220,VEGF mRNA的相对表达量分别为0.304±0.410、0.199±0.520、0.071±0.310,两者与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);Spearman相关分析显示HIF-1α和VEGF蛋白表达与其相应mRNA呈正相关(P＜0.05).结论 Endostar能够抑制EC9706增殖,其作用机制可能与进一步下调了HIF-1α和VEGF的表达有关.
目的 觀察重組血管內皮抑素(Endostar)對人食管癌細胞株EC9706細胞體外生長及對乏氧誘導因子-1 α(HIF-1α)、血管內皮生長因子(VEGF)錶達的影響.方法 採用噻唑藍(MTT)法檢測不同濃度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/L)Endostar對EC9706細胞增殖24、48、72 h的抑製率;免疫細胞化學和反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)實驗分為不同濃度(25、50、100 μg/L)實驗組和對照組,分彆作用48 h後,檢測Endostar作用後HIF-1α、VEGF蛋白和基因錶達量的變化.結果 Endostar抑製EC9706細胞增殖,呈時間和濃度依賴性,200 μg/L Endostar作用72 h,其抑製率為46.78％;免疫細胞化學檢測不同濃度(25.0、50.0、100.0 μg/L)實驗組HIF-1α的平均吸光度值分彆為0.115 ±0.009、0.089士0.011、0.056±0.009,VGFR的平均吸光度值分彆為0.137±0.007、0.102±0.008、0.063±0.007,兩者實驗各組與對照組比較差異均有統計學意義(P＜0.01);RT-PCR檢測不同濃度(25.0、50.0、100.0 μg/L)實驗組HIF-1αmRNA的相對錶達量分彆為0.469±0.530、0.233±0.280、0.171±0.220,VEGF mRNA的相對錶達量分彆為0.304±0.410、0.199±0.520、0.071±0.310,兩者與對照組比較差異均有統計學意義(P＜0.05);Spearman相關分析顯示HIF-1α和VEGF蛋白錶達與其相應mRNA呈正相關(P＜0.05).結論 Endostar能夠抑製EC9706增殖,其作用機製可能與進一步下調瞭HIF-1α和VEGF的錶達有關.
목적 관찰중조혈관내피억소(Endostar)대인식관암세포주EC9706세포체외생장급대핍양유도인자-1 α(HIF-1α)、혈관내피생장인자(VEGF)표체적영향.방법 채용새서람(MTT)법검측불동농도(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/L)Endostar대EC9706세포증식24、48、72 h적억제솔;면역세포화학화반전록-취합매련반응(RT-PCR)실험분위불동농도(25、50、100 μg/L)실험조화대조조,분별작용48 h후,검측Endostar작용후HIF-1α、VEGF단백화기인표체량적변화.결과 Endostar억제EC9706세포증식,정시간화농도의뢰성,200 μg/L Endostar작용72 h,기억제솔위46.78％;면역세포화학검측불동농도(25.0、50.0、100.0 μg/L)실험조HIF-1α적평균흡광도치분별위0.115 ±0.009、0.089사0.011、0.056±0.009,VGFR적평균흡광도치분별위0.137±0.007、0.102±0.008、0.063±0.007,량자실험각조여대조조비교차이균유통계학의의(P＜0.01);RT-PCR검측불동농도(25.0、50.0、100.0 μg/L)실험조HIF-1αmRNA적상대표체량분별위0.469±0.530、0.233±0.280、0.171±0.220,VEGF mRNA적상대표체량분별위0.304±0.410、0.199±0.520、0.071±0.310,량자여대조조비교차이균유통계학의의(P＜0.05);Spearman상관분석현시HIF-1α화VEGF단백표체여기상응mRNA정정상관(P＜0.05).결론 Endostar능구억제EC9706증식,기작용궤제가능여진일보하조료HIF-1α화VEGF적표체유관.
Objective To evaluate the effects of endostar on the growth of human esophageal carcinoma EC9706 cells and the expression of hypoxia inducible factor (HIF)-1 α and vascular endothelial growth factor (VEGF).Methods EC9706 cells were treated with different cincentrations (12.5,25.0,50.0,100.0 and 200.0 μg/L) of endostar for 24,48 and 72 h.The cell growth inhibition was assessed by methyl thiazol tetrazolium (MTT) assay.The expression of HIF-1 α and VEGF mRNA and protein in EC9706 cells was detected by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunocytochemistry respectively.Results Endostar could suppress the growth of EC9706 cells in a dose-and time-dependent response,and the inhibitive rate was 46.78％ by 200 μg/L endostar for 72 h.As compared with control group,the absorbance (A) values of HIF-1α and VEGF in different groups (25.0,50.0,100.0 μg/L endostar) was (0.115 ± 0.009),(0.089 ± 0.011) and (0.056 ± 0.009),and (0.137 ±0.007),(0.102 ±0.008) and (0.063 ±0.007),respcctlivcly,P ＜0.05.As compared with control group,the HIF-lα and VEGF mRNA expression levels in EC9706 cells were down-regulated after treatment with different cincentrations (25.0,50.0,100.0 μg/L) of endostar (0.469 ± 0.530,0.233 ± 0.280 and 0.171 ± 0.220,and 0.304 ± 0.410,0.199 ± 0.520 and 0.071 ± 0.310,respectlively,P ＜ 0.05).Spearman correlation analysis showde a positive correlation between the HIF-1 α and VEGF protein and mRNA expression.Conclusion Endostar can suppress the growth of EC9706 cells probably by further down-regulating the expression of HIF-1α and VEGF.
