西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2015年
2期
153-158
,共6页
王小燕%杨堃%黄云超%郭凤丽%陈颖%雷玉洁%汤琦%刘馨
王小燕%楊堃%黃雲超%郭鳳麗%陳穎%雷玉潔%湯琦%劉馨
왕소연%양곤%황운초%곽봉려%진영%뢰옥길%탕기%류형
表皮葡萄球菌%白假丝酵母菌%混合生物膜%Farnesol%密度感应
錶皮葡萄毬菌%白假絲酵母菌%混閤生物膜%Farnesol%密度感應
표피포도구균%백가사효모균%혼합생물막%Farnesol%밀도감응
Staphylococcus epidermidis%Candida albicans%mixed species biofilm%Farnesol%quorum sensing
目的:探讨真菌密度感应分子 Farnesol 在表皮葡萄球菌和白假丝酵母菌混合生物膜形成中的作用。方法将表皮葡萄球菌标准株 ATCC35984及白假丝酵母菌标准株 ATCC10231混合培养建立体外生物膜模型,加入 Farnesol或不加入 Farnesol 分为 Farnesol 处理组和对照组,孵育2、4、6、8、12、24、48、72、96 h 时用结晶紫染色法半定量检测生物膜形成能力;二甲氧唑黄(XTT)比色法评价生物膜的体外生长动力学;扫描电子显微镜观察生物膜超微结构;荧光定量 PCR 分析各组生物膜形成相关基因的表达情况。结果结晶紫染色法生物膜半定量检测显示,12、24 h Farnesol处理组和对照组差异有统计学意义(P <0.05)。XTT 比色法生长动力学检测显示,Farnesol 处理组在4、48 h 与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。扫描电镜结果显示,对照组混合生物膜结构较 Farnesol 处理组致密复杂。荧光定量 PCR 结果显示,培养6h Farnesol 处理组表皮葡萄球菌生物膜形成相关基因 icaA、fbe、aap 基因及白假丝酵母菌生物膜形成相关基因 als3、hwp1、efg1基因的表达下调;培养24 h Farnesol 处理组表皮葡萄球菌生物膜形成相关基因 aap 基因及白假丝酵母菌生物膜形成相关基因 als3、hwp1、efg1基 因 的 表 达 下 调。结论在真菌密度感应分子Farnesol 的干预下,对照组形成的混合生物膜较 Farnesol 处理组结构更为致密及复杂,这种结构的改变可能与 Farne-sol 处理组白假丝酵母菌生物膜形成相关基因 als3、hwp1、efg1基因的表达下调相关性更密切。
目的:探討真菌密度感應分子 Farnesol 在錶皮葡萄毬菌和白假絲酵母菌混閤生物膜形成中的作用。方法將錶皮葡萄毬菌標準株 ATCC35984及白假絲酵母菌標準株 ATCC10231混閤培養建立體外生物膜模型,加入 Farnesol或不加入 Farnesol 分為 Farnesol 處理組和對照組,孵育2、4、6、8、12、24、48、72、96 h 時用結晶紫染色法半定量檢測生物膜形成能力;二甲氧唑黃(XTT)比色法評價生物膜的體外生長動力學;掃描電子顯微鏡觀察生物膜超微結構;熒光定量 PCR 分析各組生物膜形成相關基因的錶達情況。結果結晶紫染色法生物膜半定量檢測顯示,12、24 h Farnesol處理組和對照組差異有統計學意義(P <0.05)。XTT 比色法生長動力學檢測顯示,Farnesol 處理組在4、48 h 與對照組比較,差異有統計學意義(P <0.05)。掃描電鏡結果顯示,對照組混閤生物膜結構較 Farnesol 處理組緻密複雜。熒光定量 PCR 結果顯示,培養6h Farnesol 處理組錶皮葡萄毬菌生物膜形成相關基因 icaA、fbe、aap 基因及白假絲酵母菌生物膜形成相關基因 als3、hwp1、efg1基因的錶達下調;培養24 h Farnesol 處理組錶皮葡萄毬菌生物膜形成相關基因 aap 基因及白假絲酵母菌生物膜形成相關基因 als3、hwp1、efg1基 因 的 錶 達 下 調。結論在真菌密度感應分子Farnesol 的榦預下,對照組形成的混閤生物膜較 Farnesol 處理組結構更為緻密及複雜,這種結構的改變可能與 Farne-sol 處理組白假絲酵母菌生物膜形成相關基因 als3、hwp1、efg1基因的錶達下調相關性更密切。
목적:탐토진균밀도감응분자 Farnesol 재표피포도구균화백가사효모균혼합생물막형성중적작용。방법장표피포도구균표준주 ATCC35984급백가사효모균표준주 ATCC10231혼합배양건입체외생물막모형,가입 Farnesol혹불가입 Farnesol 분위 Farnesol 처리조화대조조,부육2、4、6、8、12、24、48、72、96 h 시용결정자염색법반정량검측생물막형성능력;이갑양서황(XTT)비색법평개생물막적체외생장동역학;소묘전자현미경관찰생물막초미결구;형광정량 PCR 분석각조생물막형성상관기인적표체정황。결과결정자염색법생물막반정량검측현시,12、24 h Farnesol처리조화대조조차이유통계학의의(P <0.05)。XTT 비색법생장동역학검측현시,Farnesol 처리조재4、48 h 여대조조비교,차이유통계학의의(P <0.05)。소묘전경결과현시,대조조혼합생물막결구교 Farnesol 처리조치밀복잡。형광정량 PCR 결과현시,배양6h Farnesol 처리조표피포도구균생물막형성상관기인 icaA、fbe、aap 기인급백가사효모균생물막형성상관기인 als3、hwp1、efg1기인적표체하조;배양24 h Farnesol 처리조표피포도구균생물막형성상관기인 aap 기인급백가사효모균생물막형성상관기인 als3、hwp1、efg1기 인 적 표 체 하 조。결론재진균밀도감응분자Farnesol 적간예하,대조조형성적혼합생물막교 Farnesol 처리조결구경위치밀급복잡,저충결구적개변가능여 Farne-sol 처리조백가사효모균생물막형성상관기인 als3、hwp1、efg1기인적표체하조상관성경밀절。
(P < 0.05 ).Scanning electron microscopy showed that the three-dimensional structure of mix-biofilm in control group was more complex.As real-time PCR showed,after 6-hour culture,the expressions of icaA,fbe,aap,hwp1, als3 and efg1 genes in Farnesol group were down-regulated compared to those in control group and after 24-hour culture the expressions of aap,hwp1,als3 and efg1 genes in Farnesol group were down-regulated compared to those in control group.Conclusion With the intervention by fungal quorum sensing molecules Farnesol,the structure in control group became denser and more complex than that in Farnesol group.This change may have a closer correlation with the down-regulated expressions of als3,hwp1 and efg1 genes,which are related to the formation of Candida albicans biofilms.