西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2015年
1期
199-206
,共8页
陈颖%乐利%罗永亚%杨华%汪南阳%林芳芝%王俊霖
陳穎%樂利%囉永亞%楊華%汪南暘%林芳芝%王俊霖
진영%악리%라영아%양화%왕남양%림방지%왕준림
胞外蛋白%NL895杨%提取方法%双向电泳分析
胞外蛋白%NL895楊%提取方法%雙嚮電泳分析
포외단백%NL895양%제취방법%쌍향전영분석
extracellular proteins(ECPs)%NL895 poplar%extraction method%2-D electrophoresis
该研究以美洲黑杨杂种优良无性系NL895杨(Populus deltoides×Populus euramericana cv,)组培苗叶片和茎段为研究对象,对NL895杨叶片细胞壁蛋白(cell wall proteins,CWPs)和茎段质外体蛋白(apoplastic proteins,APPs)的提取、分离和双向电泳等技术进行了系统研究.结果表明:10 g以上叶片、超声波破碎10 min、CaCl2法提取的细胞壁蛋白效果较好,经G-6-PDH酶活性检测,提取的细胞壁蛋白胞质污染率较低;真空渗透法提取的茎段质外体蛋白胞质污染率较前者高,但在允许范围之内.TCA/丙酮沉淀法纯化提取的细胞壁蛋白、pH 4～7的24cm胶条、上样量为500 μg的双向电泳体系,其蛋白电泳图谱中的斑点多而清晰,斑点数达550多个,是叶片细胞壁蛋白电泳分析较适合的体系;pH 3～10胶条对茎段质外体蛋白的电泳分离效果较好.该研究初步建立了杨树胞外蛋白的提取、分离及2-DE电泳体系,为木本植物胞外蛋白的研究奠定了基础.
該研究以美洲黑楊雜種優良無性繫NL895楊(Populus deltoides×Populus euramericana cv,)組培苗葉片和莖段為研究對象,對NL895楊葉片細胞壁蛋白(cell wall proteins,CWPs)和莖段質外體蛋白(apoplastic proteins,APPs)的提取、分離和雙嚮電泳等技術進行瞭繫統研究.結果錶明:10 g以上葉片、超聲波破碎10 min、CaCl2法提取的細胞壁蛋白效果較好,經G-6-PDH酶活性檢測,提取的細胞壁蛋白胞質汙染率較低;真空滲透法提取的莖段質外體蛋白胞質汙染率較前者高,但在允許範圍之內.TCA/丙酮沉澱法純化提取的細胞壁蛋白、pH 4～7的24cm膠條、上樣量為500 μg的雙嚮電泳體繫,其蛋白電泳圖譜中的斑點多而清晰,斑點數達550多箇,是葉片細胞壁蛋白電泳分析較適閤的體繫;pH 3～10膠條對莖段質外體蛋白的電泳分離效果較好.該研究初步建立瞭楊樹胞外蛋白的提取、分離及2-DE電泳體繫,為木本植物胞外蛋白的研究奠定瞭基礎.
해연구이미주흑양잡충우량무성계NL895양(Populus deltoides×Populus euramericana cv,)조배묘협편화경단위연구대상,대NL895양협편세포벽단백(cell wall proteins,CWPs)화경단질외체단백(apoplastic proteins,APPs)적제취、분리화쌍향전영등기술진행료계통연구.결과표명:10 g이상협편、초성파파쇄10 min、CaCl2법제취적세포벽단백효과교호,경G-6-PDH매활성검측,제취적세포벽단백포질오염솔교저;진공삼투법제취적경단질외체단백포질오염솔교전자고,단재윤허범위지내.TCA/병동침정법순화제취적세포벽단백、pH 4～7적24cm효조、상양량위500 μg적쌍향전영체계,기단백전영도보중적반점다이청석,반점수체550다개,시협편세포벽단백전영분석교괄합적체계;pH 3～10효조대경단질외체단백적전영분리효과교호.해연구초보건립료양수포외단백적제취、분리급2-DE전영체계,위목본식물포외단백적연구전정료기출.
