CAJ | 학술논문

目的：探讨巴马系小型猪冠状动脉（冠脉）微栓塞（CME）致心功能损伤与程序性细胞死亡因子4（PDCD4）表达的动态变化及关系。 　　方法：60头巴马系小型猪经微导管左前降支注入微栓塞球构建冠脉微栓塞组；注射生理盐水构建假手术组，每组小型猪均为30只。每组小型猪随机分为0h、3h、6h、9h、12h、24h六个不同时间点观察（每个时间点小型猪均为5头）。应用心脏超声心动图检测心功能指标；组织病理切片苏木素-伊红（HE）染色和苏木素碱性复红苦味酸（HBFP）染色进行梗死区域测量；荧光定量多聚酶链反应（PCR）检测心肌组织PDCD4与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织PDCD4与TNF-α蛋白表达。 　　结果：超声心动图参数显示，冠脉微栓塞组除0 h、24 h外其余时间点左心室射血分数（LVEF）均较假手术组明显降低（P<0.05），伴随着LVEF显著下降，心脏超声心动图表现为左心室短轴缩短率（LVFS）和心排血量（CO）下降及左心室舒张末期内径（LVEDd）增加。病理学显示，冠脉微栓塞组3 h、6 h、9 h、12 h、24 h五个时间点均可见微梗死灶，但各时间点之间的微梗死面积比较差异无统计学意义（P>0.05）。荧光定量PCR结果显示，冠脉微栓塞组心肌组织PDCD4与TNF-αmRNA表达都是在3 h开始升高，9 h达高峰，12 h和24 h下降（P<0.05）；与假手术组比较，冠脉微栓塞组除0 h外其他时间点心肌组织PDCD4与TNF-αmRNA的表达量均显著增加（均P<0.05）。蛋白免疫印迹结果显示，冠脉微栓塞组心肌组织PDCD4与TNF-α的蛋白表达都是在3 h开始升高，9 h达高峰，12 h和24 h下降（P<0.05）；与假手术组比较，冠脉微栓塞组除0 h外其他时间点心肌组织PDCD4与TNF-α蛋白表达水平均显著增加（P均<0.05），差异均有统计学意义。 　　结论：PDCD4参与了冠脉微栓塞致心功能的损伤，并呈现出明显的时间变化规律，可能是通过调控心肌TNF-α的表达实现。目的：探討巴馬繫小型豬冠狀動脈（冠脈）微栓塞（CME）緻心功能損傷與程序性細胞死亡因子4（PDCD4）錶達的動態變化及關繫。 　　方法：60頭巴馬繫小型豬經微導管左前降支註入微栓塞毬構建冠脈微栓塞組；註射生理鹽水構建假手術組，每組小型豬均為30隻。每組小型豬隨機分為0h、3h、6h、9h、12h、24h六箇不同時間點觀察（每箇時間點小型豬均為5頭）。應用心髒超聲心動圖檢測心功能指標；組織病理切片囌木素-伊紅（HE）染色和囌木素堿性複紅苦味痠（HBFP）染色進行梗死區域測量；熒光定量多聚酶鏈反應（PCR）檢測心肌組織PDCD4與腫瘤壞死因子-α（TNF-α）mRNA錶達；蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測心肌組織PDCD4與TNF-α蛋白錶達。 　　結果：超聲心動圖參數顯示，冠脈微栓塞組除0 h、24 h外其餘時間點左心室射血分數（LVEF）均較假手術組明顯降低（P<0.05），伴隨著LVEF顯著下降，心髒超聲心動圖錶現為左心室短軸縮短率（LVFS）和心排血量（CO）下降及左心室舒張末期內徑（LVEDd）增加。病理學顯示，冠脈微栓塞組3 h、6 h、9 h、12 h、24 h五箇時間點均可見微梗死竈，但各時間點之間的微梗死麵積比較差異無統計學意義（P>0.05）。熒光定量PCR結果顯示，冠脈微栓塞組心肌組織PDCD4與TNF-αmRNA錶達都是在3 h開始升高，9 h達高峰，12 h和24 h下降（P<0.05）；與假手術組比較，冠脈微栓塞組除0 h外其他時間點心肌組織PDCD4與TNF-αmRNA的錶達量均顯著增加（均P<0.05）。蛋白免疫印跡結果顯示，冠脈微栓塞組心肌組織PDCD4與TNF-α的蛋白錶達都是在3 h開始升高，9 h達高峰，12 h和24 h下降（P<0.05）；與假手術組比較，冠脈微栓塞組除0 h外其他時間點心肌組織PDCD4與TNF-α蛋白錶達水平均顯著增加（P均<0.05），差異均有統計學意義。 　　結論：PDCD4參與瞭冠脈微栓塞緻心功能的損傷，併呈現齣明顯的時間變化規律，可能是通過調控心肌TNF-α的錶達實現。
목적：탐토파마계소형저관상동맥（관맥）미전새（CME）치심공능손상여정서성세포사망인자4（PDCD4）표체적동태변화급관계。 　　방법：60두파마계소형저경미도관좌전강지주입미전새구구건관맥미전새조；주사생리염수구건가수술조，매조소형저균위30지。매조소형저수궤분위0h、3h、6h、9h、12h、24h륙개불동시간점관찰（매개시간점소형저균위5두）。응용심장초성심동도검측심공능지표；조직병리절편소목소-이홍（HE）염색화소목소감성복홍고미산（HBFP）염색진행경사구역측량；형광정량다취매련반응（PCR）검측심기조직PDCD4여종류배사인자-α（TNF-α）mRNA표체；단백면역인적법（Western blot）검측심기조직PDCD4여TNF-α단백표체。 　　결과：초성심동도삼수현시，관맥미전새조제0 h、24 h외기여시간점좌심실사혈분수（LVEF）균교가수술조명현강저（P<0.05），반수착LVEF현저하강，심장초성심동도표현위좌심실단축축단솔（LVFS）화심배혈량（CO）하강급좌심실서장말기내경（LVEDd）증가。병이학현시，관맥미전새조3 h、6 h、9 h、12 h、24 h오개시간점균가견미경사조，단각시간점지간적미경사면적비교차이무통계학의의（P>0.05）。형광정량PCR결과현시，관맥미전새조심기조직PDCD4여TNF-αmRNA표체도시재3 h개시승고，9 h체고봉，12 h화24 h하강（P<0.05）；여가수술조비교，관맥미전새조제0 h외기타시간점심기조직PDCD4여TNF-αmRNA적표체량균현저증가（균P<0.05）。단백면역인적결과현시，관맥미전새조심기조직PDCD4여TNF-α적단백표체도시재3 h개시승고，9 h체고봉，12 h화24 h하강（P<0.05）；여가수술조비교，관맥미전새조제0 h외기타시간점심기조직PDCD4여TNF-α단백표체수평균현저증가（P균<0.05），차이균유통계학의의。 　　결론：PDCD4삼여료관맥미전새치심공능적손상，병정현출명현적시간변화규률，가능시통과조공심기TNF-α적표체실현。
Objective: To explore the relationship between coronary micro embolism (CME) incurred myocardial dysfunction and dynamic changes of a programmed cell death 4 (PDCD4) expression in experimental pigs. Methods: A total of 60 Bema miniature pigs were randomly divided into 2 groups: CME group, the animal model was established by injecting polyethylene microspheres into pigs’ left anterior descending artery (LAD) and Sham group, the animals received normal saline injection in LAD. n=30 in each group. Each group was further divided into 5 time points as 0h, 3h, 6h, 9h, 12h and 24h to observe the relevant indexes, n=5 in each time point. The myocardial function was detected by echocardiography, the area of infarction was examined by HIM and HBFP staining, the expressions of mRNA and protein of myocardial PDCD4 and TNF-α were measured by RT-PCR and Western blot analysis at different time points in each group. Results: ① Compared with Sham group, CME group presented decreased LVEF at each time point except for 0h, P<0.05, and with LVEF decreasing, the FS and CO reduced, while LVEDD increased accordingly. ② In CME group, the micro infraction could be found at 3h, 6h, 9h, 12h and 24h time points, and the areas of infarction were similar among different time points, P>0.05. ③In CME group, the mRNA expression of PDCD4 and TNF-αincreased at 3h time point, reached the maximum at 9h and decreased at 12h and 24h time points, P<0.05. Compared with Sham group, CME group had increased mRNA expression of PDCD4 and TNF-α at each point except for 0h, all P<0.05. ④In CME group, the protein expression of PDCD4 and TNF-α increased at 3h time point, reached the maximum at 9h and decreased at 12h and 24h time points, P<0.05. Compared with Sham group, CME group had increased protein expression of PDCD4 and TNF-αat each point except for 0h, all P<0.05. Conclusion: PDCD4 was involved in CME incurred myocardial dysfunction as time changing in experimental pigs, and this might be carried out by regulating myocardial TNF-αexpression.