山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2015年
2期
5-7
,共3页
苦参碱%肾小管上皮细胞%B7-H1基因%协同刺激分子
苦參堿%腎小管上皮細胞%B7-H1基因%協同刺激分子
고삼감%신소관상피세포%B7-H1기인%협동자격분자
matirne%tubular epithelial cell%B7-H1%co-stimulatory molecule
目的：探讨苦参碱对炎症状态下肾小管上皮细胞B7-H1 mRNA及蛋白表达的影响。方法取人肾小管上皮细胞（ HK-2）用于实验。①苦参碱浓度对B7-H1的影响：设对照组、模型组及苦参碱低、中、高剂量组，对照组仅加含5％胎牛血清的DMEM培养液，模型组及苦参碱低、中、高浓度组加入终浓度为100 g／L的IFN-γ，苦参素低、中、高浓度组再分别加入0．5、0．8、1．0 g／L的苦参碱；培养24 h，采用RT-PCR法检测HK-2细胞中的B7-H1 mRNA，流式细胞术检测B7-H1蛋白。②苦参碱干预时间对B7-H1的影响：设对照组、模型组及苦参碱不同培养时间组（12、16、24 h），对照组仅加含5％胎牛血清的DMEM培养液培养24 h，模型组加终浓度为100 g／L的IFN-γ培养24 h，苦参碱12 h、16 h、24 h组加入终浓度为100 g／L的IFN-γ和0．8 g／L的苦参碱，分别培养12、16、24 h，采用RT-PCR法检测HK-2细胞中的B7-H1 mRNA。结果模型组B7-H1 mRNA及其蛋白表达量高于对照组，苦参碱低、中、高浓度组低于模型组（P均﹤0．05）；苦参碱12 h、16 h、24 h组B7-H1 mRNA及其蛋白表达低于模型组（P均﹤0．05）。苦参碱抑制HK-2细胞B7-H1 mRNA表达作用呈剂量、时间依赖性，对B7-H1蛋白的抑制作用也呈剂量依赖性（P均﹤0．05）。结论 IFN-γ诱导的炎症状态下肾小管上皮细胞B7-H1 mRNA、蛋白表达增高，苦参碱可下调B7-H1 mRNA、蛋白表达。
目的：探討苦參堿對炎癥狀態下腎小管上皮細胞B7-H1 mRNA及蛋白錶達的影響。方法取人腎小管上皮細胞（ HK-2）用于實驗。①苦參堿濃度對B7-H1的影響：設對照組、模型組及苦參堿低、中、高劑量組，對照組僅加含5％胎牛血清的DMEM培養液，模型組及苦參堿低、中、高濃度組加入終濃度為100 g／L的IFN-γ，苦參素低、中、高濃度組再分彆加入0．5、0．8、1．0 g／L的苦參堿；培養24 h，採用RT-PCR法檢測HK-2細胞中的B7-H1 mRNA，流式細胞術檢測B7-H1蛋白。②苦參堿榦預時間對B7-H1的影響：設對照組、模型組及苦參堿不同培養時間組（12、16、24 h），對照組僅加含5％胎牛血清的DMEM培養液培養24 h，模型組加終濃度為100 g／L的IFN-γ培養24 h，苦參堿12 h、16 h、24 h組加入終濃度為100 g／L的IFN-γ和0．8 g／L的苦參堿，分彆培養12、16、24 h，採用RT-PCR法檢測HK-2細胞中的B7-H1 mRNA。結果模型組B7-H1 mRNA及其蛋白錶達量高于對照組，苦參堿低、中、高濃度組低于模型組（P均﹤0．05）；苦參堿12 h、16 h、24 h組B7-H1 mRNA及其蛋白錶達低于模型組（P均﹤0．05）。苦參堿抑製HK-2細胞B7-H1 mRNA錶達作用呈劑量、時間依賴性，對B7-H1蛋白的抑製作用也呈劑量依賴性（P均﹤0．05）。結論 IFN-γ誘導的炎癥狀態下腎小管上皮細胞B7-H1 mRNA、蛋白錶達增高，苦參堿可下調B7-H1 mRNA、蛋白錶達。
목적：탐토고삼감대염증상태하신소관상피세포B7-H1 mRNA급단백표체적영향。방법취인신소관상피세포（ HK-2）용우실험。①고삼감농도대B7-H1적영향：설대조조、모형조급고삼감저、중、고제량조，대조조부가함5％태우혈청적DMEM배양액，모형조급고삼감저、중、고농도조가입종농도위100 g／L적IFN-γ，고삼소저、중、고농도조재분별가입0．5、0．8、1．0 g／L적고삼감；배양24 h，채용RT-PCR법검측HK-2세포중적B7-H1 mRNA，류식세포술검측B7-H1단백。②고삼감간예시간대B7-H1적영향：설대조조、모형조급고삼감불동배양시간조（12、16、24 h），대조조부가함5％태우혈청적DMEM배양액배양24 h，모형조가종농도위100 g／L적IFN-γ배양24 h，고삼감12 h、16 h、24 h조가입종농도위100 g／L적IFN-γ화0．8 g／L적고삼감，분별배양12、16、24 h，채용RT-PCR법검측HK-2세포중적B7-H1 mRNA。결과모형조B7-H1 mRNA급기단백표체량고우대조조，고삼감저、중、고농도조저우모형조（P균﹤0．05）；고삼감12 h、16 h、24 h조B7-H1 mRNA급기단백표체저우모형조（P균﹤0．05）。고삼감억제HK-2세포B7-H1 mRNA표체작용정제량、시간의뢰성，대B7-H1단백적억제작용야정제량의뢰성（P균﹤0．05）。결론 IFN-γ유도적염증상태하신소관상피세포B7-H1 mRNA、단백표체증고，고삼감가하조B7-H1 mRNA、단백표체。
Objective To explore the effect of matrine on expression of B 7-H1 in tubular epithelial cells .Methods①The effect on different dose of matrine:human HK-2 cells were cultured under five culture conditions to observe and di-vided into 4 groups, which was control group(5%fetal calf serum+DMEM for 24 h), model group (IFN-100 g/L for 24 h), matrine group (IFN-100 g/L+0.8 g/L matrine for 12 h,16 h and 24 h) .The expression of B7-H1 mRNA was evalu-ated by using real time RT-PCR.The surface expression of B7-H1 on HK-2 was analyzed by using flow cytometry .②The effect on different time of matrine: cell were divided into control group (5% fetal calf serum+DMEM for 24 h), model group (IFN-100 g/L for 24 h), matrine group (IFN-100 g/L+0.8 g/L matrine for 12 h,16 h and 24 h).The expression of B7-H1 mRNA was evaluated by using real time RT-PCR.Results The expression of B7-H1 on HK-2 cells was de-creased in normal condition .IFN-can significantly increased the expression of B 7-H1.Matrine decreased the B7-H1 ex-pression of HK-2 cells in a dose and time dependent way at mRNA levels and in a dose dependent way at protein levels ( P<0.05).Conclusion B7-H1 mRNA and protein increased under the condition of inflammation induced by IFN -γ.Ma-trine could down regulate the expression of B 7-H1 mRNA and protein .
