CAJ | 학술논문

为了在人乳腺肿瘤上皮细胞系中表达重组人胶质细胞源性神经营养因子（ GDNF ），本研究构建了牛β－casein基因启动子驱动的重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体，用脂质体介导法将其导入人乳腺肿瘤上皮细胞系Bcap－37细胞中，经G418抗性筛选8～10 d后，分离稳定表达红色荧光蛋白的转染细胞，PCR鉴定转基因细胞，用催乳素、胰岛素及氢化可的松诱导培养转基因细胞，RT－PCR和Western Blot检测重组人GDNF的表达分泌。结果表明：重组人GDNF乳腺上皮细胞特异表达载体被成功构建，转染Bcap－37细胞后，稳定整合到细胞染色体中，转基因细胞经激素诱导后能够表达分泌糖基化的 GDNF，为高效制备与天然人GDNF蛋白结构完全一致的重组人GDNF蛋白用于帕金森病临床治疗研究奠定了基础。
위료재인유선종류상피세포계중표체중조인효질세포원성신경영양인자（ GDNF ），본연구구건료우β－casein기인계동자구동적중조인GDNF유선상피세포특이표체재체，용지질체개도법장기도입인유선종류상피세포계Bcap－37세포중，경G418항성사선8～10 d후，분리은정표체홍색형광단백적전염세포，PCR감정전기인세포，용최유소、이도소급경화가적송유도배양전기인세포，RT－PCR화Western Blot검측중조인GDNF적표체분비。결과표명：중조인GDNF유선상피세포특이표체재체피성공구건，전염Bcap－37세포후，은정정합도세포염색체중，전기인세포경격소유도후능구표체분비당기화적 GDNF，위고효제비여천연인GDNF단백결구완전일치적중조인GDNF단백용우파금삼병림상치료연구전정료기출。