CAJ | 학술논문

目的：观察益气化瘀补肾方对大鼠损伤椎间盘软骨终板细胞的影响方法选择SPF级Wistar大鼠椎间盘分离软骨终板并培养，将生长良好的细胞随机分为正常组、诱导损伤组与给药组。正常组细胞培养用胎牛血清体积分数为0．005的DMEM培养基；诱导损伤组给予体积分数为0．005的胎牛血清与浓度为10μg／L的白介素-1β（IL-1β）混合的DMEM培养基；给药组为益气化瘀补肾方含药血清加体积分数为0．005的胎牛血清与浓度为10μg／L的IL-1β混合的DMEM培养基。使用细胞增殖—毒性检测试剂盒（ CCK-8）检测各组大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖的影响。实时荧光定量PCR检测聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶-13基因的表达差别。流式细胞仪检测益气化瘀补肾方对软骨终板细胞凋亡的影响。结果正常组软骨终板细胞正常生长，增殖良好，诱导损伤组椎间盘软骨终板细胞的增殖受到明显抑制，给药组软骨终板细胞增殖缓慢，3组之间比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。与正常组比较，诱导损伤组软骨终板细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原基因表达下调，基质金属蛋白酶-13基因表达上调，差异均有统计学意义（ P＜0．05）。而给药组较诱导损伤组软骨终板细胞蛋白聚糖、Ⅱ型胶原基因表达上调，基质金属蛋白酶-13基因表达下调，差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论益气化瘀补肾方含药血清能够抑制IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞损伤，起到延缓椎间盘推变的作用。
목적：관찰익기화어보신방대대서손상추간반연골종판세포적영향방법선택SPF급Wistar대서추간반분리연골종판병배양，장생장량호적세포수궤분위정상조、유도손상조여급약조。정상조세포배양용태우혈청체적분수위0．005적DMEM배양기；유도손상조급여체적분수위0．005적태우혈청여농도위10μg／L적백개소-1β（IL-1β）혼합적DMEM배양기；급약조위익기화어보신방함약혈청가체적분수위0．005적태우혈청여농도위10μg／L적IL-1β혼합적DMEM배양기。사용세포증식—독성검측시제합（ CCK-8）검측각조대서추간반연골종판세포증식적영향。실시형광정량PCR검측취집단백취당、Ⅱ형효원、기질금속단백매-13기인적표체차별。류식세포의검측익기화어보신방대연골종판세포조망적영향。결과정상조연골종판세포정상생장，증식량호，유도손상조추간반연골종판세포적증식수도명현억제，급약조연골종판세포증식완만，3조지간비교차이유통계학의의（ P＜0．05）。여정상조비교，유도손상조연골종판세포단백취당、Ⅱ형효원기인표체하조，기질금속단백매-13기인표체상조，차이균유통계학의의（ P＜0．05）。이급약조교유도손상조연골종판세포단백취당、Ⅱ형효원기인표체상조，기질금속단백매-13기인표체하조，차이균유통계학의의（P＜0．05）。결론익기화어보신방함약혈청능구억제IL-1β유도적대서추간반연골종판세포손상，기도연완추간반추변적작용。