安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2015年
5期
15-20
,共6页
水曲柳%基因克隆%CBF%昼夜节律
水麯柳%基因剋隆%CBF%晝夜節律
수곡류%기인극륭%CBF%주야절률
Fraxinus mandschurica%Cloning%CBF%Circadian
[目的]探讨水曲柳CBF基因的表达及与生物钟调控的关系.[方法]利用cDNA末端快速克隆(RACE)技术克隆水曲柳CBF1基因的全长序列,并对三年生水曲柳幼苗叶片中FmCBF1基因的时间表达特征进行初步研究.[结果]利用RNA末端快速扩增(RACE)的方法从水曲柳中克隆得到1个CBF基因家族成员FmCBF1 (GenBank:KJ541508.1),该基因ORF 669bp,推测编码蛋白质含有222个氨基酸残基,相对分子质量24.5 kD,理论等电点为5.11,在DNA序列内不合内含子.氨基酸序列同源性比较发现,水曲柳FmCBF1基因与白桦BpCBF1同源性最高,相似性达79.4％,在系统进化树中处于同一分支上.实时荧光定量PCR表达特性分析显示,FmCBF1基因的表达具有一个大约以24h为周期的节律性,最大值约出现在9:00,而夜间却处于较低的表达水平.在4℃低温处理1、3、6、12、24、72和120 h后FmCBF1的qRT-PCR分析表明,该基因受到低温诱导,并在4℃条件下随低温时间的延长,该基因的诱导表达特性呈先升后降的趋势,最大值出现在12h时,达对照的25.5倍.[结论]为进一步研究水曲柳抗旱耐寒性及分子育种奠定基础.
[目的]探討水麯柳CBF基因的錶達及與生物鐘調控的關繫.[方法]利用cDNA末耑快速剋隆(RACE)技術剋隆水麯柳CBF1基因的全長序列,併對三年生水麯柳幼苗葉片中FmCBF1基因的時間錶達特徵進行初步研究.[結果]利用RNA末耑快速擴增(RACE)的方法從水麯柳中剋隆得到1箇CBF基因傢族成員FmCBF1 (GenBank:KJ541508.1),該基因ORF 669bp,推測編碼蛋白質含有222箇氨基痠殘基,相對分子質量24.5 kD,理論等電點為5.11,在DNA序列內不閤內含子.氨基痠序列同源性比較髮現,水麯柳FmCBF1基因與白樺BpCBF1同源性最高,相似性達79.4％,在繫統進化樹中處于同一分支上.實時熒光定量PCR錶達特性分析顯示,FmCBF1基因的錶達具有一箇大約以24h為週期的節律性,最大值約齣現在9:00,而夜間卻處于較低的錶達水平.在4℃低溫處理1、3、6、12、24、72和120 h後FmCBF1的qRT-PCR分析錶明,該基因受到低溫誘導,併在4℃條件下隨低溫時間的延長,該基因的誘導錶達特性呈先升後降的趨勢,最大值齣現在12h時,達對照的25.5倍.[結論]為進一步研究水麯柳抗旱耐寒性及分子育種奠定基礎.
[목적]탐토수곡류CBF기인적표체급여생물종조공적관계.[방법]이용cDNA말단쾌속극륭(RACE)기술극륭수곡류CBF1기인적전장서렬,병대삼년생수곡류유묘협편중FmCBF1기인적시간표체특정진행초보연구.[결과]이용RNA말단쾌속확증(RACE)적방법종수곡류중극륭득도1개CBF기인가족성원FmCBF1 (GenBank:KJ541508.1),해기인ORF 669bp,추측편마단백질함유222개안기산잔기,상대분자질량24.5 kD,이론등전점위5.11,재DNA서렬내불합내함자.안기산서렬동원성비교발현,수곡류FmCBF1기인여백화BpCBF1동원성최고,상사성체79.4％,재계통진화수중처우동일분지상.실시형광정량PCR표체특성분석현시,FmCBF1기인적표체구유일개대약이24h위주기적절률성,최대치약출현재9:00,이야간각처우교저적표체수평.재4℃저온처리1、3、6、12、24、72화120 h후FmCBF1적qRT-PCR분석표명,해기인수도저온유도,병재4℃조건하수저온시간적연장,해기인적유도표체특성정선승후강적추세,최대치출현재12h시,체대조적25.5배.[결론]위진일보연구수곡류항한내한성급분자육충전정기출.
