标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
표기면역분석여림상
LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2015年
2期
138-141
,共4页
杨超一%张雪峰%李子颖%冯婷婷
楊超一%張雪峰%李子穎%馮婷婷
양초일%장설봉%리자영%풍정정
肌红蛋白%单克隆抗体%酶促化学发光免疫分析%酶联免疫分析
肌紅蛋白%單剋隆抗體%酶促化學髮光免疫分析%酶聯免疫分析
기홍단백%단극륭항체%매촉화학발광면역분석%매련면역분석
Myoglobin%Monoclonal antibody%Chemiluminescence immunoassay%Enzyme-linked immunosorbent assay
目的 制备和鉴定抗肌红蛋白(Mb)单克隆抗体,为人肌红蛋白检测试剂的研制奠定基础.方法 用人肌红蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,用ELISA方法筛选,有限稀释法进行克隆化培养阳性杂交瘤细胞株.ELISA法测定小鼠腹水滴度,CLIA法对抗体进行配对实验与特异性鉴定.结果 筛选培养出9株分泌抗肌红蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水滴度为1∶5×104 ~ 1∶2×105.通过配对实验,有5株抗体6种组合可以成功配对.这5株抗体的亲和常数为6.46×108 ~ 3.68×109 L/mol.用5株抗体所建立的6种化学免疫分析方法与人Hb交叉反应率为7.434×103% ~2.904×10-2%,与人ALB交叉反应率为4.980×10-7% ~3.830×10-5%.用Mb17B6与Mb21E8两株抗体建立的CLIA标准曲线的线性系数为0.997,灵敏度为6.02ng/mL.结论 成功制备了可以应用于免疫分析的抗肌红蛋白单克隆抗体.
目的 製備和鑒定抗肌紅蛋白(Mb)單剋隆抗體,為人肌紅蛋白檢測試劑的研製奠定基礎.方法 用人肌紅蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術進行細胞融閤,用ELISA方法篩選,有限稀釋法進行剋隆化培養暘性雜交瘤細胞株.ELISA法測定小鼠腹水滴度,CLIA法對抗體進行配對實驗與特異性鑒定.結果 篩選培養齣9株分泌抗肌紅蛋白單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,腹水滴度為1∶5×104 ~ 1∶2×105.通過配對實驗,有5株抗體6種組閤可以成功配對.這5株抗體的親和常數為6.46×108 ~ 3.68×109 L/mol.用5株抗體所建立的6種化學免疫分析方法與人Hb交扠反應率為7.434×103% ~2.904×10-2%,與人ALB交扠反應率為4.980×10-7% ~3.830×10-5%.用Mb17B6與Mb21E8兩株抗體建立的CLIA標準麯線的線性繫數為0.997,靈敏度為6.02ng/mL.結論 成功製備瞭可以應用于免疫分析的抗肌紅蛋白單剋隆抗體.
목적 제비화감정항기홍단백(Mb)단극륭항체,위인기홍단백검측시제적연제전정기출.방법 용인기홍단백항원면역BALB/c소서,채용잡교류기술진행세포융합,용ELISA방법사선,유한희석법진행극륭화배양양성잡교류세포주.ELISA법측정소서복수적도,CLIA법대항체진행배대실험여특이성감정.결과 사선배양출9주분비항기홍단백단극륭항체적잡교류세포주,복수적도위1∶5×104 ~ 1∶2×105.통과배대실험,유5주항체6충조합가이성공배대.저5주항체적친화상수위6.46×108 ~ 3.68×109 L/mol.용5주항체소건립적6충화학면역분석방법여인Hb교차반응솔위7.434×103% ~2.904×10-2%,여인ALB교차반응솔위4.980×10-7% ~3.830×10-5%.용Mb17B6여Mb21E8량주항체건립적CLIA표준곡선적선성계수위0.997,령민도위6.02ng/mL.결론 성공제비료가이응용우면역분석적항기홍단백단극륭항체.