农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2015年
3期
414-420
,共7页
董振%王权威%刘振%李春义
董振%王權威%劉振%李春義
동진%왕권위%류진%리춘의
鹿茸再生干细胞%蛋白质组%双向电泳%条件优化
鹿茸再生榦細胞%蛋白質組%雙嚮電泳%條件優化
록용재생간세포%단백질조%쌍향전영%조건우화
Antler stem cells%Proteome%Two-dimensional electrophoresis%Condition optimization
鹿茸是目前唯一可以完全再生的哺乳动物附属器官,这种再生基于鹿茸再生干细胞.本研究以梅花鹿(Cervus nippon)鹿茸再生干细胞为样品,在处理方法、染色方法、蛋白纯化和等电聚焦条件4个方面对蛋白质组双向电泳进行优化.结果显示,利用Bullet Blender细胞组织破碎仪处理细胞优于超声波破碎;双染法染色能够得到更多且更清晰的蛋白点;等电聚焦总volt-hours在15 000 volt-hours时竖条纹相对较少;通过比较6种不同的蛋白提取方法与纯化方法组合,发现采用自制裂解液与双向电泳纯化试剂盒纯化相结合的方式获得的电泳图谱较好.通过综合优化后的双向电泳技术所得到的蛋白图谱中蛋白点相对较多且圆滑,条纹现象较轻,重复性较好,满足后续软件分析以及数据处理的要求,本研究为不同发育期梅花鹿鹿茸再生干细胞比较蛋白质组学研究提供了基础实验数据.
鹿茸是目前唯一可以完全再生的哺乳動物附屬器官,這種再生基于鹿茸再生榦細胞.本研究以梅花鹿(Cervus nippon)鹿茸再生榦細胞為樣品,在處理方法、染色方法、蛋白純化和等電聚焦條件4箇方麵對蛋白質組雙嚮電泳進行優化.結果顯示,利用Bullet Blender細胞組織破碎儀處理細胞優于超聲波破碎;雙染法染色能夠得到更多且更清晰的蛋白點;等電聚焦總volt-hours在15 000 volt-hours時豎條紋相對較少;通過比較6種不同的蛋白提取方法與純化方法組閤,髮現採用自製裂解液與雙嚮電泳純化試劑盒純化相結閤的方式穫得的電泳圖譜較好.通過綜閤優化後的雙嚮電泳技術所得到的蛋白圖譜中蛋白點相對較多且圓滑,條紋現象較輕,重複性較好,滿足後續軟件分析以及數據處理的要求,本研究為不同髮育期梅花鹿鹿茸再生榦細胞比較蛋白質組學研究提供瞭基礎實驗數據.
록용시목전유일가이완전재생적포유동물부속기관,저충재생기우록용재생간세포.본연구이매화록(Cervus nippon)록용재생간세포위양품,재처리방법、염색방법、단백순화화등전취초조건4개방면대단백질조쌍향전영진행우화.결과현시,이용Bullet Blender세포조직파쇄의처리세포우우초성파파쇄;쌍염법염색능구득도경다차경청석적단백점;등전취초총volt-hours재15 000 volt-hours시수조문상대교소;통과비교6충불동적단백제취방법여순화방법조합,발현채용자제렬해액여쌍향전영순화시제합순화상결합적방식획득적전영도보교호.통과종합우화후적쌍향전영기술소득도적단백도보중단백점상대교다차원활,조문현상교경,중복성교호,만족후속연건분석이급수거처리적요구,본연구위불동발육기매화록록용재생간세포비교단백질조학연구제공료기출실험수거.
