CAJ | 학술논문

安祖花(Anthurium andraeanum)是近年来非常流行的年宵花卉之一.为了优化安祖花的遗传转化体系,本研究以安祖花Arizona品种组培苗的叶片为外植体,将构建好的重组质粒pSN 1301-HYG-PhCHS在根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101介导下转化安祖花.优化后的体系为:首先将组培苗幼嫩叶片切块后置于1/3MS预培养基(附加200 mg/L NH4NO3,0.5 mg/L BA,0.05 mg/L 2,4-D,5 g/L琼脂,30 g/L蔗糖)中预培育3d,然后用根癌农杆菌(菌液OD600=0.5)侵染10 min,将侵染过的叶片接种于MS培养基,28℃黑暗条件下共培养3d,之后转移到附加有500 mg/L羧苄青霉素和30 mg/L潮霉素的愈伤诱导培养基中进行筛选.结果表明,抗性愈伤组织形成率可达到5％～6％.对体系优化过程中获得的14株抗性转基因植株进行PCR检测,其中9株为阳性,证实矮牵牛查尔酮合成酶基因(Petunia hybrida chalcone synthase gene,PhCHS)已经转入安祖花Arizona中.该研究结果为利用转基因方法改良安祖花品种提供了技术保障.
안조화(Anthurium andraeanum)시근년래비상류행적년소화훼지일.위료우화안조화적유전전화체계,본연구이안조화Arizona품충조배묘적협편위외식체,장구건호적중조질립pSN 1301-HYG-PhCHS재근암농간균(Agrobacterium tumefaciens) GV3101개도하전화안조화.우화후적체계위:수선장조배묘유눈협편절괴후치우1/3MS예배양기(부가200 mg/L NH4NO3,0.5 mg/L BA,0.05 mg/L 2,4-D,5 g/L경지,30 g/L자당)중예배육3d,연후용근암농간균(균액OD600=0.5)침염10 min,장침염과적협편접충우MS배양기,28℃흑암조건하공배양3d,지후전이도부가유500 mg/L최변청매소화30 mg/L조매소적유상유도배양기중진행사선.결과표명,항성유상조직형성솔가체도5％～6％.대체계우화과정중획득적14주항성전기인식주진행PCR검측,기중9주위양성,증실왜견우사이동합성매기인(Petunia hybrida chalcone synthase gene,PhCHS)이경전입안조화Arizona중.해연구결과위이용전기인방법개량안조화품충제공료기술보장.