棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2015年
1期
31-38
,共8页
于月华%倪志勇%梁小莉%刘真芳%陈全家%高文伟
于月華%倪誌勇%樑小莉%劉真芳%陳全傢%高文偉
우월화%예지용%량소리%류진방%진전가%고문위
棉花%GhMYB%原核表达%基因克隆
棉花%GhMYB%原覈錶達%基因剋隆
면화%GhMYB%원핵표체%기인극륭
cotton%GhMYB%prokaryotic expression%gene clone
从棉花中克隆了1个MYB基因,命名为GhMYB(GenBank No.HQ234875).该基因cDNA全长1264bp,具有1个774 bp的开放阅读框,5'非编码区为250 bp,3'非编码区为240 bp,编码256个氨基酸,预测分子量约为28.867 kDa,等电点为8.56,推测的氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域.GhMYB基因组序列长度为1355 bp,包含2个外显子和1个内含子.氨基酸同源分析发现,GhMYB与来自可可、陆地棉和巴旦木的MYB同源性较高.亚细胞定位结果表明,GhMYB:GFP融合蛋白定位于细胞核中.SDS-PAGE电泳分析表明,pET-28a-GhMYB最佳诱导表达条件为1.0 mmol· L-1 IPTG在37℃下诱导4h.电子表达谱分析表明,GhMYB基因在棉铃中特异表达,在根和叶中受水涝胁迫的诱导表达.
從棉花中剋隆瞭1箇MYB基因,命名為GhMYB(GenBank No.HQ234875).該基因cDNA全長1264bp,具有1箇774 bp的開放閱讀框,5'非編碼區為250 bp,3'非編碼區為240 bp,編碼256箇氨基痠,預測分子量約為28.867 kDa,等電點為8.56,推測的氨基痠序列中含有2箇高度保守的SANT結構域.GhMYB基因組序列長度為1355 bp,包含2箇外顯子和1箇內含子.氨基痠同源分析髮現,GhMYB與來自可可、陸地棉和巴旦木的MYB同源性較高.亞細胞定位結果錶明,GhMYB:GFP融閤蛋白定位于細胞覈中.SDS-PAGE電泳分析錶明,pET-28a-GhMYB最佳誘導錶達條件為1.0 mmol· L-1 IPTG在37℃下誘導4h.電子錶達譜分析錶明,GhMYB基因在棉鈴中特異錶達,在根和葉中受水澇脅迫的誘導錶達.
종면화중극륭료1개MYB기인,명명위GhMYB(GenBank No.HQ234875).해기인cDNA전장1264bp,구유1개774 bp적개방열독광,5'비편마구위250 bp,3'비편마구위240 bp,편마256개안기산,예측분자량약위28.867 kDa,등전점위8.56,추측적안기산서렬중함유2개고도보수적SANT결구역.GhMYB기인조서렬장도위1355 bp,포함2개외현자화1개내함자.안기산동원분석발현,GhMYB여래자가가、륙지면화파단목적MYB동원성교고.아세포정위결과표명,GhMYB:GFP융합단백정위우세포핵중.SDS-PAGE전영분석표명,pET-28a-GhMYB최가유도표체조건위1.0 mmol· L-1 IPTG재37℃하유도4h.전자표체보분석표명,GhMYB기인재면령중특이표체,재근화협중수수로협박적유도표체.
