棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2015年
1期
9-15
,共7页
刘灵娣%唐宏亮%董丽君%张书玲%吴立柱%杜环%高佳佳%赵晓雅%刘晗
劉靈娣%唐宏亮%董麗君%張書玲%吳立柱%杜環%高佳佳%趙曉雅%劉晗
류령제%당굉량%동려군%장서령%오립주%두배%고가가%조효아%류함
棉花%子房滴注转化%钾离子转运蛋白%转基因植株%钾营养%盐胁迫
棉花%子房滴註轉化%鉀離子轉運蛋白%轉基因植株%鉀營養%鹽脅迫
면화%자방적주전화%갑리자전운단백%전기인식주%갑영양%염협박
cotton (Gossypium hirsutum L.)%ovary-drip transformation%potassium ion transport protein%transformed plants%potassium nutrition%salt-tolerance
棉花植株再生困难、基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展.本研究利用1种不依赖组织培养的转化方法,即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1)导入棉花基因组中.结果表明在1006株转化幼苗中有44株为卡那抗性植株,其中35株经PCR检测为阳性(T0代),转化率为3.5％.Southern与Northern杂交结果进一步表明外源基因已整合至棉花基因组中并在转录水平上表达.在提供外源0.05 mmol·L-1 K+水平下,T1转基因棉花叶片中K+含量约为对照植株的2倍,在根中约为野生型植株的1.5倍;而在2.5 mmol·L-1 K+的正常水平下,转基因棉花与野生型植株K+含量差异不明显.在50～200 mmol·L-1 NaCl胁迫条件下,转基因棉花的种子发芽率明显高于野生型植株,尤其是在150mmol·L-1NaCl胁迫条件下,转基因植株种子的发芽率是野生型的2.8倍左右.本研究为子房滴注转化体系在生产实践中的广泛应用提供了理论依据,并为培育适应土壤钾素匮乏及盐渍化环境下生长的棉花新品种提供了新的种质资源.
棉花植株再生睏難、基因型依賴性彊和轉化週期長等因素一直製約著棉花遺傳轉化的髮展.本研究利用1種不依賴組織培養的轉化方法,即子房滴註轉化方法將獐茅高親和性鉀離子轉運蛋白基因(AlHAK1)導入棉花基因組中.結果錶明在1006株轉化幼苗中有44株為卡那抗性植株,其中35株經PCR檢測為暘性(T0代),轉化率為3.5％.Southern與Northern雜交結果進一步錶明外源基因已整閤至棉花基因組中併在轉錄水平上錶達.在提供外源0.05 mmol·L-1 K+水平下,T1轉基因棉花葉片中K+含量約為對照植株的2倍,在根中約為野生型植株的1.5倍;而在2.5 mmol·L-1 K+的正常水平下,轉基因棉花與野生型植株K+含量差異不明顯.在50～200 mmol·L-1 NaCl脅迫條件下,轉基因棉花的種子髮芽率明顯高于野生型植株,尤其是在150mmol·L-1NaCl脅迫條件下,轉基因植株種子的髮芽率是野生型的2.8倍左右.本研究為子房滴註轉化體繫在生產實踐中的廣汎應用提供瞭理論依據,併為培育適應土壤鉀素匱乏及鹽漬化環境下生長的棉花新品種提供瞭新的種質資源.
면화식주재생곤난、기인형의뢰성강화전화주기장등인소일직제약착면화유전전화적발전.본연구이용1충불의뢰조직배양적전화방법,즉자방적주전화방법장장모고친화성갑리자전운단백기인(AlHAK1)도입면화기인조중.결과표명재1006주전화유묘중유44주위잡나항성식주,기중35주경PCR검측위양성(T0대),전화솔위3.5％.Southern여Northern잡교결과진일보표명외원기인이정합지면화기인조중병재전록수평상표체.재제공외원0.05 mmol·L-1 K+수평하,T1전기인면화협편중K+함량약위대조식주적2배,재근중약위야생형식주적1.5배;이재2.5 mmol·L-1 K+적정상수평하,전기인면화여야생형식주K+함량차이불명현.재50～200 mmol·L-1 NaCl협박조건하,전기인면화적충자발아솔명현고우야생형식주,우기시재150mmol·L-1NaCl협박조건하,전기인식주충자적발아솔시야생형적2.8배좌우.본연구위자방적주전화체계재생산실천중적엄범응용제공료이론의거,병위배육괄응토양갑소궤핍급염지화배경하생장적면화신품충제공료신적충질자원.
