浙江中医药大学学报
浙江中醫藥大學學報
절강중의약대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2014年
12期
1355-1362
,共8页
潘佩蕾%潘平%吕迪%丁滨%钱朝东%刘翔宇%毛建洋%丁志山%蒋福升
潘珮蕾%潘平%呂迪%丁濱%錢朝東%劉翔宇%毛建洋%丁誌山%蔣福升
반패뢰%반평%려적%정빈%전조동%류상우%모건양%정지산%장복승
金属蛋白酶%抗原肽%尖吻蝮蛇蛇毒%免疫%IgY%出血型蛇毒
金屬蛋白酶%抗原肽%尖吻蝮蛇蛇毒%免疫%IgY%齣血型蛇毒
금속단백매%항원태%첨문복사사독%면역%IgY%출혈형사독
metalloproteinase%antigen peptide%Deinagkistrodon acutusvenom%immune%IgY%hemorrhagic snake venom
[目的]制备针对尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶类共同基序的IgY抗体,并对其中和蛇毒活性的作用进行研究.[方法]通过分析尖吻蝮蛇蛇毒各类金属蛋白酶类共有序列,设计合成与其酶活性密切相关且高度保守的抗原肽PT1和PT2;偶联复合物KLH-PT1、KLH-PT2免疫母鸡获得IgY抗体.采用ELISA和Western blot等方法对IgY效价及与尖吻蝮蛇蛇毒和短尾蝮蛇蛇毒的交叉反应特性进行初步研究;最后通过抗小鼠皮下出血实验对IgY中和活性进行评价.[结果]ELISA、Western blot结果表明,抗KLH-PT1、抗尖吻蝮蛇蛇毒IgY均可与尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒发生交叉反应且后者显著强于前者;抗KLH-PT2 IgY在体外与尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒无明显交叉反应,在体内抗出血实验中却表现出很强的中和毒性作用,并且显著优于前两者.[结论]通过设计金属蛋白酶共有序列抗原肽,制备了能与多种血循型蛇毒交叉反应的IgY抗体,这为制备特异、高效、低毒性且广谱的抗出血型蛇毒抗体奠定了基础.
[目的]製備針對尖吻蝮蛇蛇毒金屬蛋白酶類共同基序的IgY抗體,併對其中和蛇毒活性的作用進行研究.[方法]通過分析尖吻蝮蛇蛇毒各類金屬蛋白酶類共有序列,設計閤成與其酶活性密切相關且高度保守的抗原肽PT1和PT2;偶聯複閤物KLH-PT1、KLH-PT2免疫母鷄穫得IgY抗體.採用ELISA和Western blot等方法對IgY效價及與尖吻蝮蛇蛇毒和短尾蝮蛇蛇毒的交扠反應特性進行初步研究;最後通過抗小鼠皮下齣血實驗對IgY中和活性進行評價.[結果]ELISA、Western blot結果錶明,抗KLH-PT1、抗尖吻蝮蛇蛇毒IgY均可與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒髮生交扠反應且後者顯著彊于前者;抗KLH-PT2 IgY在體外與尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒無明顯交扠反應,在體內抗齣血實驗中卻錶現齣很彊的中和毒性作用,併且顯著優于前兩者.[結論]通過設計金屬蛋白酶共有序列抗原肽,製備瞭能與多種血循型蛇毒交扠反應的IgY抗體,這為製備特異、高效、低毒性且廣譜的抗齣血型蛇毒抗體奠定瞭基礎.
[목적]제비침대첨문복사사독금속단백매류공동기서적IgY항체,병대기중화사독활성적작용진행연구.[방법]통과분석첨문복사사독각류금속단백매류공유서렬,설계합성여기매활성밀절상관차고도보수적항원태PT1화PT2;우련복합물KLH-PT1、KLH-PT2면역모계획득IgY항체.채용ELISA화Western blot등방법대IgY효개급여첨문복사사독화단미복사사독적교차반응특성진행초보연구;최후통과항소서피하출혈실험대IgY중화활성진행평개.[결과]ELISA、Western blot결과표명,항KLH-PT1、항첨문복사사독IgY균가여첨문복사사독、단미복사사독발생교차반응차후자현저강우전자;항KLH-PT2 IgY재체외여첨문복사사독、단미복사사독무명현교차반응,재체내항출혈실험중각표현출흔강적중화독성작용,병차현저우우전량자.[결론]통과설계금속단백매공유서렬항원태,제비료능여다충혈순형사독교차반응적IgY항체,저위제비특이、고효、저독성차엄보적항출혈형사독항체전정료기출.
