禽肉瘤白血病病毒重组载体的包装及病毒滴度的测定
금육류백혈병병독중조재체적포장급병독적도적측정
Recombinant Vector Packaging of Avian Sarcoma Leucosis Virus and Viral Titer Determination
  • 万方数据
    湖北农业科学 호북농업과학

    2014年 22期 5470-5473 ,共4页

    龚萍%杨宇%杨永平%叶胜强%王丽霞%邓兵%喻婷%钱运国%龚炎长

    공평%양우%양영평%협성강%왕려하%산병%유정%전운국%공염장

    逆转录病毒载体%病毒包装%绿色荧光蛋白%病毒滴度 逆轉錄病毒載體%病毒包裝%綠色熒光蛋白%病毒滴度
    역전록병독재체%병독포장%록색형광단백%병독적도
    retrovirus vector%virus packaging%green fluorescent protein%viral titer
    将重组逆转录病毒融合蛋白表达载体RCASBP-GFP-SMARCE1包装为病毒颗粒,并测定其病毒滴度.利用脂质体转染法在DF-1细胞系中转染重组质粒,收集上清液,超速离心浓缩病毒,用GFP标记法测定病毒滴度.结果显示,转染后3～4 d可见少许GFP阳性细胞的出现,6～7 d后所有细胞均有GFP的表达,11d左右细胞达到超汇合状态,开始收集上清液;GFP标记法测定超速离心后的病毒滴度为5×1010IU/mL.结果表明,成功制备了高滴度的重组逆转录病毒颗粒,为下一步在胚胎中进行相关基因的功能研究奠定了基础.
    장중조역전록병독융합단백표체재체RCASBP-GFP-SMARCE1포장위병독과립,병측정기병독적도.이용지질체전염법재DF-1세포계중전염중조질립,수집상청액,초속리심농축병독,용GFP표기법측정병독적도.결과현시,전염후3～4 d가견소허GFP양성세포적출현,6～7 d후소유세포균유GFP적표체,11d좌우세포체도초회합상태,개시수집상청액;GFP표기법측정초속리심후적병독적도위5×1010IU/mL.결과표명,성공제비료고적도적중조역전록병독과립,위하일보재배태중진행상관기인적공능연구전정료기출.
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