中华细胞与干细胞杂志(电子版)
中華細胞與榦細胞雜誌(電子版)
중화세포여간세포잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF CELL AND STEM CELL
2014年
4期
26-29
,共4页
宋焕瑾%姬钢%兰宾尚%程斌%王伟卓
宋煥瑾%姬鋼%蘭賓尚%程斌%王偉卓
송환근%희강%란빈상%정빈%왕위탁
间充质干细胞%肠黏膜%绿色荧光蛋白质类
間充質榦細胞%腸黏膜%綠色熒光蛋白質類
간충질간세포%장점막%록색형광단백질류
目的 利用绿色荧光蛋白(EGFP)标记兔来源的骨髓间充质干细胞(BMSC),观察其作为种子细胞复合SIS基质体外培养的生长特性,为复合物回植体内时间提供参考.方法 通过物理和化学方法制备小肠黏膜下层(SIS);取新西兰大白兔分离BMSC,体外培养增殖至P3代,行转染增强型EGFP,转染前后根据增殖速度,绘制生长曲线.然后将转染后的第3代BMSC,以30×106的浓度接种于l cm×1 cm大小的SIS支架材料上培养.观察细胞转染后的生长特性,检测复合后的细胞总数,荧光显微镜观察复合后细胞形态.结果 BMSC经转染后生长增殖速度未受明显影响.细胞DNA检测显示复合物培养第7天培养结果显示细胞增殖状态最佳差异有统计学意义(P<0.05).荧光显微镜观察显示复合物培养7天细胞增殖良好差异有统计学意义(P<0.05),第10天后呈现老化状态.结论 增强型的EGFP转染不影响BMSC传代以及增殖.BMSC-SIS基质复合物体外培养7d回植较为合适.
目的 利用綠色熒光蛋白(EGFP)標記兔來源的骨髓間充質榦細胞(BMSC),觀察其作為種子細胞複閤SIS基質體外培養的生長特性,為複閤物迴植體內時間提供參攷.方法 通過物理和化學方法製備小腸黏膜下層(SIS);取新西蘭大白兔分離BMSC,體外培養增殖至P3代,行轉染增彊型EGFP,轉染前後根據增殖速度,繪製生長麯線.然後將轉染後的第3代BMSC,以30×106的濃度接種于l cm×1 cm大小的SIS支架材料上培養.觀察細胞轉染後的生長特性,檢測複閤後的細胞總數,熒光顯微鏡觀察複閤後細胞形態.結果 BMSC經轉染後生長增殖速度未受明顯影響.細胞DNA檢測顯示複閤物培養第7天培養結果顯示細胞增殖狀態最佳差異有統計學意義(P<0.05).熒光顯微鏡觀察顯示複閤物培養7天細胞增殖良好差異有統計學意義(P<0.05),第10天後呈現老化狀態.結論 增彊型的EGFP轉染不影響BMSC傳代以及增殖.BMSC-SIS基質複閤物體外培養7d迴植較為閤適.
목적 이용록색형광단백(EGFP)표기토래원적골수간충질간세포(BMSC),관찰기작위충자세포복합SIS기질체외배양적생장특성,위복합물회식체내시간제공삼고.방법 통과물리화화학방법제비소장점막하층(SIS);취신서란대백토분리BMSC,체외배양증식지P3대,행전염증강형EGFP,전염전후근거증식속도,회제생장곡선.연후장전염후적제3대BMSC,이30×106적농도접충우l cm×1 cm대소적SIS지가재료상배양.관찰세포전염후적생장특성,검측복합후적세포총수,형광현미경관찰복합후세포형태.결과 BMSC경전염후생장증식속도미수명현영향.세포DNA검측현시복합물배양제7천배양결과현시세포증식상태최가차이유통계학의의(P<0.05).형광현미경관찰현시복합물배양7천세포증식량호차이유통계학의의(P<0.05),제10천후정현노화상태.결론 증강형적EGFP전염불영향BMSC전대이급증식.BMSC-SIS기질복합물체외배양7d회식교위합괄.