厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2015年
1期
36-40
,共5页
金科华%吴昕瑞%王苗苗%宋思扬
金科華%吳昕瑞%王苗苗%宋思颺
금과화%오흔서%왕묘묘%송사양
乳酸脱氢酶A%表达%抑制剂%筛选模型
乳痠脫氫酶A%錶達%抑製劑%篩選模型
유산탈경매A%표체%억제제%사선모형
LDHA%expression%inhibitors%screening model
在多数肿瘤细胞中高度表达的乳酸脱氢酶A(LDHA)与肿瘤的发生、发展和预后密切相关,筛选LDHA小分子抑制剂可提供一种富有潜力的靶向抗肿瘤策略.本研究以pET-28a为载体,构建了人LDHA表达质粒并于大肠杆菌BL21 (DE3)中稳定表达,产量达到2.65 mg/L.基于LDHA的催化反应建立了以丙酮酸钠和还原型烟酰胺腺嘌呤二核甘酸(NADH)为底物的筛选模型.实验结果表明:模型的LDHA最适质量浓度为60 ng/mL,以质量分数0.25％草酸铵为阳性对照,筛选模型的Z因子为0.812.至此,本研究建立了LDHA抑制剂体外生化筛选模型,其成本低、可操作性强,符合高通量筛选要求,为发现新颖的LDHA抑制剂奠定了基础.
在多數腫瘤細胞中高度錶達的乳痠脫氫酶A(LDHA)與腫瘤的髮生、髮展和預後密切相關,篩選LDHA小分子抑製劑可提供一種富有潛力的靶嚮抗腫瘤策略.本研究以pET-28a為載體,構建瞭人LDHA錶達質粒併于大腸桿菌BL21 (DE3)中穩定錶達,產量達到2.65 mg/L.基于LDHA的催化反應建立瞭以丙酮痠鈉和還原型煙酰胺腺嘌呤二覈甘痠(NADH)為底物的篩選模型.實驗結果錶明:模型的LDHA最適質量濃度為60 ng/mL,以質量分數0.25％草痠銨為暘性對照,篩選模型的Z因子為0.812.至此,本研究建立瞭LDHA抑製劑體外生化篩選模型,其成本低、可操作性彊,符閤高通量篩選要求,為髮現新穎的LDHA抑製劑奠定瞭基礎.
재다수종류세포중고도표체적유산탈경매A(LDHA)여종류적발생、발전화예후밀절상관,사선LDHA소분자억제제가제공일충부유잠력적파향항종류책략.본연구이pET-28a위재체,구건료인LDHA표체질립병우대장간균BL21 (DE3)중은정표체,산량체도2.65 mg/L.기우LDHA적최화반응건립료이병동산납화환원형연선알선표령이핵감산(NADH)위저물적사선모형.실험결과표명:모형적LDHA최괄질량농도위60 ng/mL,이질량분수0.25％초산안위양성대조,사선모형적Z인자위0.812.지차,본연구건립료LDHA억제제체외생화사선모형,기성본저、가조작성강,부합고통량사선요구,위발현신영적LDHA억제제전정료기출.
