河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
12期
156-159
,共4页
陆辉%李晶%左伟勇%王健%王永娟
陸輝%李晶%左偉勇%王健%王永娟
륙휘%리정%좌위용%왕건%왕영연
乌头碱%双酯型乌头碱%活化酯法%完全抗原%制备%鉴定
烏頭堿%雙酯型烏頭堿%活化酯法%完全抗原%製備%鑒定
오두감%쌍지형오두감%활화지법%완전항원%제비%감정
aconitine%double ester aconitine%active ester method%complete antigen%preparation%identification
为制备双酯型乌头碱(DAC)的完全抗原,通过活化酯法将小分子的DAC偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA),合成免疫原DAC-BSA、检测原DAC-OVA,采用紫外扫描光谱法、BCA试剂盒法、酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果.结果表明,免疫原和检测原均偶联成功;按100 μg/只的剂量每2周免疫一次小鼠,共免疫5次,最后一次免疫4d后,眼眶静脉采血,测定多抗血清的效价均达到1∶25 600,且第2组小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为30 ng/mL,最低检出限为1 ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于1％,具有很好的特异性.成功合成了DAC人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清.
為製備雙酯型烏頭堿(DAC)的完全抗原,通過活化酯法將小分子的DAC偶聯到牛血清白蛋白(BSA)和鷄卵清白蛋白(OVA),閤成免疫原DAC-BSA、檢測原DAC-OVA,採用紫外掃描光譜法、BCA試劑盒法、酶聯免疫吸附法(ELISA)鑒定偶聯結果.結果錶明,免疫原和檢測原均偶聯成功;按100 μg/隻的劑量每2週免疫一次小鼠,共免疫5次,最後一次免疫4d後,眼眶靜脈採血,測定多抗血清的效價均達到1∶25 600,且第2組小鼠多抗血清的敏感性最好,半數抑製濃度(IC50)為30 ng/mL,最低檢齣限為1 ng/mL,與其他藥物的交扠反應率均小于1％,具有很好的特異性.成功閤成瞭DAC人工抗原,併得到瞭敏感性高、特異性好的多抗血清.
위제비쌍지형오두감(DAC)적완전항원,통과활화지법장소분자적DAC우련도우혈청백단백(BSA)화계란청백단백(OVA),합성면역원DAC-BSA、검측원DAC-OVA,채용자외소묘광보법、BCA시제합법、매련면역흡부법(ELISA)감정우련결과.결과표명,면역원화검측원균우련성공;안100 μg/지적제량매2주면역일차소서,공면역5차,최후일차면역4d후,안광정맥채혈,측정다항혈청적효개균체도1∶25 600,차제2조소서다항혈청적민감성최호,반수억제농도(IC50)위30 ng/mL,최저검출한위1 ng/mL,여기타약물적교차반응솔균소우1％,구유흔호적특이성.성공합성료DAC인공항원,병득도료민감성고、특이성호적다항혈청.
