CAJ | 학술논문

[目的]在间充质干细胞诱导成软骨分化过程中,探讨miR-19a与细胞周期基因CCND1之间的关系,为揭示miR-19a参与调控成软骨分化的可能机制提供基础.[方法]选取小鼠间充质干细胞C3H10T1/2为研究对象,运用离心沉淀法进行pellet细胞微球培养,用含有TGF-β3及2％FBS的高糖DMEM进行成软骨诱导并作为实验组,用含2％FBS的高糖DMEM培养(替换)导作为对照组.分别在1、2、3周进行定量PCR检测成软骨分化相关基因表达以及在第3周进行甲苯胺蓝染色.[结果]与对照组比较,细胞功能基因Bax与Klf-4表达均下调,差异具有统计学意义(P＜0.05).成软骨分化关键启动因子SOX-9及相关基因aggrecan,collagen Ⅱ,Collagen Xa1的表达均在2周时显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).通过互联网生物信息学预测CCND1可能是miR-19a的靶基因;在成软骨分化过程中,miR-19a表达逐渐上升(P＜0.05),而CCND1的表达与对照组相比逐渐下降(P＜0.05).甲苯胺蓝染色pellet细胞微球呈蓝紫色,细胞核呈深蓝色,诱导组中细胞外基质含量明显增多.[结论]在C3H10T1/2成软骨分化过程中,miR-19a参与维持细胞干性及增殖基因表达降低,分化能力得到增强;且miR-19a参与该分化调控过程.
[목적]재간충질간세포유도성연골분화과정중,탐토miR-19a여세포주기기인CCND1지간적관계,위게시miR-19a삼여조공성연골분화적가능궤제제공기출.[방법]선취소서간충질간세포C3H10T1/2위연구대상,운용리심침정법진행pellet세포미구배양,용함유TGF-β3급2％FBS적고당DMEM진행성연골유도병작위실험조,용함2％FBS적고당DMEM배양(체환)도작위대조조.분별재1、2、3주진행정량PCR검측성연골분화상관기인표체이급재제3주진행갑분알람염색.[결과]여대조조비교,세포공능기인Bax여Klf-4표체균하조,차이구유통계학의의(P＜0.05).성연골분화관건계동인자SOX-9급상관기인aggrecan,collagen Ⅱ,Collagen Xa1적표체균재2주시현저승고,차이구유통계학의의(P＜0.05).통과호련망생물신식학예측CCND1가능시miR-19a적파기인;재성연골분화과정중,miR-19a표체축점상승(P＜0.05),이CCND1적표체여대조조상비축점하강(P＜0.05).갑분알람염색pellet세포미구정람자색,세포핵정심람색,유도조중세포외기질함량명현증다.[결론]재C3H10T1/2성연골분화과정중,miR-19a삼여유지세포간성급증식기인표체강저,분화능력득도증강;차miR-19a삼여해분화조공과정.