中国现代神经疾病杂志
中國現代神經疾病雜誌
중국현대신경질병잡지
CHINESE JOURNAL OF CONTEMPORARY NEUROLOGY AND NEUROSURGERY
2014年
11期
972-978
,共7页
蔡浩%吴秋静%朱延霞%赵文%李斌%宋毅军
蔡浩%吳鞦靜%硃延霞%趙文%李斌%宋毅軍
채호%오추정%주연하%조문%리빈%송의군
癫(癎)%海马%脑源性神经营养因子%蛋白酪氨酸激酶类%微RNAs%转染%免疫印迹法%细胞,培养的
癲(癎)%海馬%腦源性神經營養因子%蛋白酪氨痠激酶類%微RNAs%轉染%免疫印跡法%細胞,培養的
전(간)%해마%뇌원성신경영양인자%단백락안산격매류%미RNAs%전염%면역인적법%세포,배양적
Epilepsy%Hippocampus%Brain-derived neurotrophic factor%Protein-tyrosine kinases%MicroRNAs%Transfection%Immunoblotting%Cells,cultured
目的 探讨海马神经元癫(癎)模型转染微小RNA(miRNA)-212对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号转导通路的影响.方法 经体外培养7d的大鼠海马神经元(正常对照组),通过无镁离子细胞外液处理(3 h)方法建立癫(癎)神经元模型(癫(癎)模型组),继而以含镁离子正常细胞外液与慢病毒稀释液转染构建miRNA-212慢病毒表达载体;免疫荧光双染法、膜片钳技术和免疫印迹法观察转染miRNA-212对BDNF/TrkB信号转导通路的影响.结果 无论是正常海马神经元或癫痴神经元模型,与BDNF共培养后其磷酸化TrkB (pTrkB)/TrkB比值均显著升高(P=0.001),表明BDNF/TrkB信号转导通路被激活;转染miRNA-212后,癫(癎)神经元模型pTrkB/TrkB比值降低并低于未转染者(P=0.001),提示BDNF/TrkB信号转导通路受到抑制.结论 BDNF具有激活海马神经元BDNF/TrkB信号转导通路作用,而转染miRNA-212可抑制BDNF/TrkB信号转导通路.
目的 探討海馬神經元癲(癎)模型轉染微小RNA(miRNA)-212對腦源性神經營養因子(BDNF)/酪氨痠蛋白激酶B(TrkB)信號轉導通路的影響.方法 經體外培養7d的大鼠海馬神經元(正常對照組),通過無鎂離子細胞外液處理(3 h)方法建立癲(癎)神經元模型(癲(癎)模型組),繼而以含鎂離子正常細胞外液與慢病毒稀釋液轉染構建miRNA-212慢病毒錶達載體;免疫熒光雙染法、膜片鉗技術和免疫印跡法觀察轉染miRNA-212對BDNF/TrkB信號轉導通路的影響.結果 無論是正常海馬神經元或癲癡神經元模型,與BDNF共培養後其燐痠化TrkB (pTrkB)/TrkB比值均顯著升高(P=0.001),錶明BDNF/TrkB信號轉導通路被激活;轉染miRNA-212後,癲(癎)神經元模型pTrkB/TrkB比值降低併低于未轉染者(P=0.001),提示BDNF/TrkB信號轉導通路受到抑製.結論 BDNF具有激活海馬神經元BDNF/TrkB信號轉導通路作用,而轉染miRNA-212可抑製BDNF/TrkB信號轉導通路.
목적 탐토해마신경원전(간)모형전염미소RNA(miRNA)-212대뇌원성신경영양인자(BDNF)/락안산단백격매B(TrkB)신호전도통로적영향.방법 경체외배양7d적대서해마신경원(정상대조조),통과무미리자세포외액처리(3 h)방법건립전(간)신경원모형(전(간)모형조),계이이함미리자정상세포외액여만병독희석액전염구건miRNA-212만병독표체재체;면역형광쌍염법、막편겸기술화면역인적법관찰전염miRNA-212대BDNF/TrkB신호전도통로적영향.결과 무론시정상해마신경원혹전치신경원모형,여BDNF공배양후기린산화TrkB (pTrkB)/TrkB비치균현저승고(P=0.001),표명BDNF/TrkB신호전도통로피격활;전염miRNA-212후,전(간)신경원모형pTrkB/TrkB비치강저병저우미전염자(P=0.001),제시BDNF/TrkB신호전도통로수도억제.결론 BDNF구유격활해마신경원BDNF/TrkB신호전도통로작용,이전염miRNA-212가억제BDNF/TrkB신호전도통로.
