泸州医学院学报
瀘州醫學院學報
로주의학원학보
JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE
2014年
6期
549-552
,共4页
程俊%曾晓荣%谭晓秋%李鹏云%文静%毛亮%杨艳
程俊%曾曉榮%譚曉鞦%李鵬雲%文靜%毛亮%楊豔
정준%증효영%담효추%리붕운%문정%모량%양염
大电导钙激活钾通道%HEK 293%膜片钳
大電導鈣激活鉀通道%HEK 293%膜片鉗
대전도개격활갑통도%HEK 293%막편겸
目的:本研究旨在HEK 293细胞系上成功表达人肠系膜血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa),建立一种稳定高效表达人肠系膜血管平滑肌细胞BKCa的HEK 293细胞系方法,进一步揭示在工具细胞表达上的BKCa的基本特性,为以后的诸多实验提供参考价值.方法:应用基因工程技术构建人肠系膜血管平滑肌细胞BKCa通道基因表达载体,用脂质体转染法转染HEK 293细胞,建立了稳定高效表达BKCa通道的HEK 293细胞系的方法.结果:在HEK 293细胞系上表达的BKCa单通道电流的电导值为229.56±4.62 pS,具有电压依赖性,钙离子敏感性等特性;在HEK 293细胞系表达的BKCa全细胞宏观电流具有明显的电压依赖性和外向整流特性.结论:成功建立了一种在HEK293细胞系上表达的BKCa通道的实验方法,并成功记录到BKCa通道的单通道电流和全细胞宏观电流,且与天然细胞上BKCa通道电流特性基本一致.
目的:本研究旨在HEK 293細胞繫上成功錶達人腸繫膜血管平滑肌細胞大電導鈣激活鉀通道(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa),建立一種穩定高效錶達人腸繫膜血管平滑肌細胞BKCa的HEK 293細胞繫方法,進一步揭示在工具細胞錶達上的BKCa的基本特性,為以後的諸多實驗提供參攷價值.方法:應用基因工程技術構建人腸繫膜血管平滑肌細胞BKCa通道基因錶達載體,用脂質體轉染法轉染HEK 293細胞,建立瞭穩定高效錶達BKCa通道的HEK 293細胞繫的方法.結果:在HEK 293細胞繫上錶達的BKCa單通道電流的電導值為229.56±4.62 pS,具有電壓依賴性,鈣離子敏感性等特性;在HEK 293細胞繫錶達的BKCa全細胞宏觀電流具有明顯的電壓依賴性和外嚮整流特性.結論:成功建立瞭一種在HEK293細胞繫上錶達的BKCa通道的實驗方法,併成功記錄到BKCa通道的單通道電流和全細胞宏觀電流,且與天然細胞上BKCa通道電流特性基本一緻.
목적:본연구지재HEK 293세포계상성공표체인장계막혈관평활기세포대전도개격활갑통도(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa),건립일충은정고효표체인장계막혈관평활기세포BKCa적HEK 293세포계방법,진일보게시재공구세포표체상적BKCa적기본특성,위이후적제다실험제공삼고개치.방법:응용기인공정기술구건인장계막혈관평활기세포BKCa통도기인표체재체,용지질체전염법전염HEK 293세포,건립료은정고효표체BKCa통도적HEK 293세포계적방법.결과:재HEK 293세포계상표체적BKCa단통도전류적전도치위229.56±4.62 pS,구유전압의뢰성,개리자민감성등특성;재HEK 293세포계표체적BKCa전세포굉관전류구유명현적전압의뢰성화외향정류특성.결론:성공건립료일충재HEK293세포계상표체적BKCa통도적실험방법,병성공기록도BKCa통도적단통도전류화전세포굉관전류,차여천연세포상BKCa통도전류특성기본일치.
