中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
6期
1561-1566
,共6页
唐善浩%裴仁治%马俊霞%张丕胜%刘旭辉%杜小红%陈冬%沙科娅%曹俊杰
唐善浩%裴仁治%馬俊霞%張丕勝%劉旭輝%杜小紅%陳鼕%沙科婭%曹俊傑
당선호%배인치%마준하%장비성%류욱휘%두소홍%진동%사과아%조준걸
H3K27甲基化抑制剂%EPZ005687%U937细胞%CD34+细胞%细胞增殖%细胞凋亡%细胞周期
H3K27甲基化抑製劑%EPZ005687%U937細胞%CD34+細胞%細胞增殖%細胞凋亡%細胞週期
H3K27갑기화억제제%EPZ005687%U937세포%CD34+세포%세포증식%세포조망%세포주기
H3K27 methylation inhibitor%EPZ005687%U937 cell%CD34+ cell%cell proliferation%cell apoptosis%cell cycle
本研究目的在于探讨组蛋白H3 K27甲基化抑制剂新药EPZ005687对白血病细胞系U937细胞和正常骨髓CD34+细胞的凋亡、增殖抑制和细胞周期的影响.以不同浓度的EPZ005687作用于U937细胞,在不同时间点采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡,WST-1法检测细胞增殖,7-AAD流式细胞术检测法检测细胞周期,免疫化学法检测H3K27组蛋白甲基化活性.结果表明:EPZ005687显著诱导U937细胞的凋亡,在0.5、1、5和10 μmol/L浓度下作用于U937细胞48 h后,其凋亡率分别为3.96％±0.79％ 、5.74％±0.73％、13.34％±1.77％和25.24％±2.55％,而EPZ005687对正常骨髓CD34+细胞的凋亡影响较小;在0.5、l、5和10 μmol/L浓度下CD34+细胞凋亡率分别为3.64％±0.62％、4.28％±0.99％ 、6.18％±1.19％和7.56％±1.34％;0.5、1、5和10 μmol/L浓度的EPZ005687分别作用于U937细胞12h至96 h,作用CD34+细胞1至5d,明显观察到EPZ005687显著抑制U937细胞的增殖且呈剂量依赖性,而对正常CD34+细胞的增殖抑制并不明显.细胞周期分析显示,1 μmol/L EPZ005687作用72 h可使U937细胞明显阻滞于C1期(64.18％±13.27％vs 49.43％±12.54％),S期细胞比例明显下降低(9.67％±2.61％vs 15.26％±5.58％),而正常CD34+细胞因多数细胞位于G1期,S期细胞较少而不受其影响.进一步的H3 K27组蛋白甲基化检测分析显示,EZP005687可明显地降低U937细胞的H3 K27组蛋白甲基化,而不降低正常CD34+细胞的H3 K27组蛋白甲基化.结论:组蛋白H3 K27甲基化抑制剂EPZ005687明显抑制U937细胞的增殖,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,但对正常造血细胞CD34+影响较小,可作为一种潜在的血液肿瘤治疗药物应用于临床.
本研究目的在于探討組蛋白H3 K27甲基化抑製劑新藥EPZ005687對白血病細胞繫U937細胞和正常骨髓CD34+細胞的凋亡、增殖抑製和細胞週期的影響.以不同濃度的EPZ005687作用于U937細胞,在不同時間點採用Annexin V/PI法檢測細胞凋亡,WST-1法檢測細胞增殖,7-AAD流式細胞術檢測法檢測細胞週期,免疫化學法檢測H3K27組蛋白甲基化活性.結果錶明:EPZ005687顯著誘導U937細胞的凋亡,在0.5、1、5和10 μmol/L濃度下作用于U937細胞48 h後,其凋亡率分彆為3.96％±0.79％ 、5.74％±0.73％、13.34％±1.77％和25.24％±2.55％,而EPZ005687對正常骨髓CD34+細胞的凋亡影響較小;在0.5、l、5和10 μmol/L濃度下CD34+細胞凋亡率分彆為3.64％±0.62％、4.28％±0.99％ 、6.18％±1.19％和7.56％±1.34％;0.5、1、5和10 μmol/L濃度的EPZ005687分彆作用于U937細胞12h至96 h,作用CD34+細胞1至5d,明顯觀察到EPZ005687顯著抑製U937細胞的增殖且呈劑量依賴性,而對正常CD34+細胞的增殖抑製併不明顯.細胞週期分析顯示,1 μmol/L EPZ005687作用72 h可使U937細胞明顯阻滯于C1期(64.18％±13.27％vs 49.43％±12.54％),S期細胞比例明顯下降低(9.67％±2.61％vs 15.26％±5.58％),而正常CD34+細胞因多數細胞位于G1期,S期細胞較少而不受其影響.進一步的H3 K27組蛋白甲基化檢測分析顯示,EZP005687可明顯地降低U937細胞的H3 K27組蛋白甲基化,而不降低正常CD34+細胞的H3 K27組蛋白甲基化.結論:組蛋白H3 K27甲基化抑製劑EPZ005687明顯抑製U937細胞的增殖,誘導細胞凋亡和細胞週期阻滯,但對正常造血細胞CD34+影響較小,可作為一種潛在的血液腫瘤治療藥物應用于臨床.
본연구목적재우탐토조단백H3 K27갑기화억제제신약EPZ005687대백혈병세포계U937세포화정상골수CD34+세포적조망、증식억제화세포주기적영향.이불동농도적EPZ005687작용우U937세포,재불동시간점채용Annexin V/PI법검측세포조망,WST-1법검측세포증식,7-AAD류식세포술검측법검측세포주기,면역화학법검측H3K27조단백갑기화활성.결과표명:EPZ005687현저유도U937세포적조망,재0.5、1、5화10 μmol/L농도하작용우U937세포48 h후,기조망솔분별위3.96％±0.79％ 、5.74％±0.73％、13.34％±1.77％화25.24％±2.55％,이EPZ005687대정상골수CD34+세포적조망영향교소;재0.5、l、5화10 μmol/L농도하CD34+세포조망솔분별위3.64％±0.62％、4.28％±0.99％ 、6.18％±1.19％화7.56％±1.34％;0.5、1、5화10 μmol/L농도적EPZ005687분별작용우U937세포12h지96 h,작용CD34+세포1지5d,명현관찰도EPZ005687현저억제U937세포적증식차정제량의뢰성,이대정상CD34+세포적증식억제병불명현.세포주기분석현시,1 μmol/L EPZ005687작용72 h가사U937세포명현조체우C1기(64.18％±13.27％vs 49.43％±12.54％),S기세포비례명현하강저(9.67％±2.61％vs 15.26％±5.58％),이정상CD34+세포인다수세포위우G1기,S기세포교소이불수기영향.진일보적H3 K27조단백갑기화검측분석현시,EZP005687가명현지강저U937세포적H3 K27조단백갑기화,이불강저정상CD34+세포적H3 K27조단백갑기화.결론:조단백H3 K27갑기화억제제EPZ005687명현억제U937세포적증식,유도세포조망화세포주기조체,단대정상조혈세포CD34+영향교소,가작위일충잠재적혈액종류치료약물응용우림상.
