复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2015年
1期
57-61,100
,共6页
董玉林%曹德利%张志军%高永静%倪衡建
董玉林%曹德利%張誌軍%高永靜%倪衡建
동옥림%조덕리%장지군%고영정%예형건
慢性炎症性疼痛%杏仁核%单核细胞趋化因子(MCP-1)%小鼠%完全弗氏佐剂(CFA)
慢性炎癥性疼痛%杏仁覈%單覈細胞趨化因子(MCP-1)%小鼠%完全弗氏佐劑(CFA)
만성염증성동통%행인핵%단핵세포추화인자(MCP-1)%소서%완전불씨좌제(CFA)
chronic inflammatory pain%the central nucleus of the amygdala (CeA)%monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1)%mouse%complete Freund's adjuvant (CFA)
目的 观察完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导的小鼠慢性炎症性疼痛模型中,单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CCR2在杏仁核脑区(the central nucleus of the amygdala,CeA)中的表达变化以及细胞定位情况.方法 足底皮下注射CFA 20μL,制作慢性炎症性疼痛模型,用行为学方法检测小鼠的机械性刺激缩爪阂值和热刺激缩爪潜伏期的变化;用real-time PCR法检测造模后不同时间点CeA中MCP-1/CCR2 mRNA的表达变化;用Western blot法检测造模后不同时间点CeA中CCR2蛋白的表达变化;选择CFA 7天组,用免疫荧光染色来观察CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达情况,并用双标染色来定位表达MCP-1/CCR2的细胞类型.结果 造模1h后小鼠同侧后爪机械性缩爪阈值和热缩爪潜伏期显著降低(P＜0.001),并能维持7天以上;造模1天后,CeA中MCP-1 mRNA表达量增加(P＜0.05),7天达高峰(P＜0.01),一直持续到14天(P＜0.05);CCR2 mRNA从造模6h起表达增加(P＜0.05);Western blot 结果显示CeA中CCR2蛋白在造模后各个时间点均有表达上调,7天达高峰(P＜0.01),一直持续到14天(P＜ 0.01);免疫荧光染色显示,CFA 7天组CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达与生理盐水对照组相比均有增加,而且荧光双标染色显示MCP-1/CCR2蛋白主要与神经元核标记物(NeuN)共标.结论 足底皮下注射CFA能诱导小鼠产生机械性触诱发痛和热痛觉过敏,CeA中MCP-1/CCR2 mRNA和蛋白表达均增加,且均在神经元表达,提示该部位表达增加的MCP-1/CCR2可能参与炎症性疼痛的维持过程.
目的 觀察完全弗氏佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA)誘導的小鼠慢性炎癥性疼痛模型中,單覈細胞趨化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受體CCR2在杏仁覈腦區(the central nucleus of the amygdala,CeA)中的錶達變化以及細胞定位情況.方法 足底皮下註射CFA 20μL,製作慢性炎癥性疼痛模型,用行為學方法檢測小鼠的機械性刺激縮爪閡值和熱刺激縮爪潛伏期的變化;用real-time PCR法檢測造模後不同時間點CeA中MCP-1/CCR2 mRNA的錶達變化;用Western blot法檢測造模後不同時間點CeA中CCR2蛋白的錶達變化;選擇CFA 7天組,用免疫熒光染色來觀察CeA中MCP-1/CCR2蛋白的錶達情況,併用雙標染色來定位錶達MCP-1/CCR2的細胞類型.結果 造模1h後小鼠同側後爪機械性縮爪閾值和熱縮爪潛伏期顯著降低(P＜0.001),併能維持7天以上;造模1天後,CeA中MCP-1 mRNA錶達量增加(P＜0.05),7天達高峰(P＜0.01),一直持續到14天(P＜0.05);CCR2 mRNA從造模6h起錶達增加(P＜0.05);Western blot 結果顯示CeA中CCR2蛋白在造模後各箇時間點均有錶達上調,7天達高峰(P＜0.01),一直持續到14天(P＜ 0.01);免疫熒光染色顯示,CFA 7天組CeA中MCP-1/CCR2蛋白的錶達與生理鹽水對照組相比均有增加,而且熒光雙標染色顯示MCP-1/CCR2蛋白主要與神經元覈標記物(NeuN)共標.結論 足底皮下註射CFA能誘導小鼠產生機械性觸誘髮痛和熱痛覺過敏,CeA中MCP-1/CCR2 mRNA和蛋白錶達均增加,且均在神經元錶達,提示該部位錶達增加的MCP-1/CCR2可能參與炎癥性疼痛的維持過程.
목적 관찰완전불씨좌제(complete Freund's adjuvant,CFA)유도적소서만성염증성동통모형중,단핵세포추화인자(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)급기수체CCR2재행인핵뇌구(the central nucleus of the amygdala,CeA)중적표체변화이급세포정위정황.방법 족저피하주사CFA 20μL,제작만성염증성동통모형,용행위학방법검측소서적궤계성자격축조애치화열자격축조잠복기적변화;용real-time PCR법검측조모후불동시간점CeA중MCP-1/CCR2 mRNA적표체변화;용Western blot법검측조모후불동시간점CeA중CCR2단백적표체변화;선택CFA 7천조,용면역형광염색래관찰CeA중MCP-1/CCR2단백적표체정황,병용쌍표염색래정위표체MCP-1/CCR2적세포류형.결과 조모1h후소서동측후조궤계성축조역치화열축조잠복기현저강저(P＜0.001),병능유지7천이상;조모1천후,CeA중MCP-1 mRNA표체량증가(P＜0.05),7천체고봉(P＜0.01),일직지속도14천(P＜0.05);CCR2 mRNA종조모6h기표체증가(P＜0.05);Western blot 결과현시CeA중CCR2단백재조모후각개시간점균유표체상조,7천체고봉(P＜0.01),일직지속도14천(P＜ 0.01);면역형광염색현시,CFA 7천조CeA중MCP-1/CCR2단백적표체여생리염수대조조상비균유증가,이차형광쌍표염색현시MCP-1/CCR2단백주요여신경원핵표기물(NeuN)공표.결론 족저피하주사CFA능유도소서산생궤계성촉유발통화열통각과민,CeA중MCP-1/CCR2 mRNA화단백표체균증가,차균재신경원표체,제시해부위표체증가적MCP-1/CCR2가능삼여염증성동통적유지과정.
